| 研究概要 |
昨年、動脈硬化病巣表層部を認識するASHla/256C抗体の抗原物質が、不飽和脂肪酸を含有するホスファチジルコリン(PC)であることを明らかにしたが、本年度は、(1)抗原物質としてのPCの構造活性相関、(2)PCの抗原性を増強する物質の探索、(3)動脈硬化巣に存在する抗原性を増加させる物質の分離、特にこの3点について研究した。その結果、(1)種々のPCの中では、1-stearoyl-2-linoleoyl PCが、最もASHla/256C抗体と反応性が高く、dilinoleoyl PCがこれに次いだ。オレイン酸やアラキドン酸を含むPCも反応したが、反応性はそれほど高くなく、不飽和結合の数と反応性には相関がなかった。不飽和結合はPCの立体構造への寄与していると考えられた。(2)動脈硬化巣内膜肥厚部には多量の中性脂質が蓄積しており、本抗体は内膜肥厚部の細胞間マトリックスを染色する。そこで、本抗体と全く反応しないtriglyceride (TG), cholesterol ester (CE)を一定量PCと共存させて、抗体の反応性を調べたところ、PC: TG or CE=1:2〜2:1の範囲で、PCの抗原活性が8〜10倍に増加した。中性脂質が抗原活性を増強すことを確認した。(3)動脈硬化巣の内膜肥厚部から脂質を抽出して、Hexane, 2-Propanol, waterの溶媒でシリカゲルカラムを用いて抗原を分離すると、抗原であるPCは水11.2%付近に溶出するが、それ以外の画分は本抗体とは反応しない。この「それ以外の画分」とPCとを共存させて、本抗体の反応性をみると、水2.2%付近に溶出するピークと、水7.8%付近に溶出してくる画分が、PCの抗原活性を増強する性質を持つことを確認した。前者のピークを分析すると、大部分は、TG, CEであった。このPC抗原複合体は、動脈硬化巣で泡沫化したマクロファージの崩壊してできる脂質粒のモデルとも考えられるので、次年度は、実際に抗原物質複合体を分離して、その成分と動脈硬化との関連について検討したい。
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