HTLV-1の種特異性、組織特異性を決定する遺伝子の単離およびその応用

• 研究課題/領域番号: 07807036
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 小糸 厚 筑波大学, 基礎医学系, 講師 (70231305)
• 研究分担者: 中内 啓充 (中内 啓光) 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (40175485) ; 廣近 玲 通産省工業技術院, 産業技術融合領域研究所, 特別技術補助職員 (90260223)
• 研究期間 (年度): 1995 – 1996
• 研究課題ステータス: 完了 (1996年度)
• 配分額: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円); 1996年度: 800千円 (直接経費: 800千円); 1995年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
• キーワード: レトロウイルス / トロピズム / エンベロープ / HTLV・I / HIVベクター / レトロウィルス / HTLV-1 / レセプター / 組換えレトロウイルス / Pseudotype / パッケージング

研究概要

HTLV-Iエンベロープを介して,その標的細胞の核内に組換えHIVゲノムをtransduceさせ,マーカー遺伝子(green fluorescent protein;GFP)を発現させるシステムを樹立した(Koito et al.投稿準備中)。また通常のアルゴン光(488nm)ではなく紫外線(395nm)により蛍光を励起しうる変異GFP(GFPuv)をマーカーとして有するHIVを作製中であり,これらの組換えレトロウイルスとFACSを駆使し,ヒト細胞群中のHTLV-I標的細胞を明確にしていく。
またHTLV-Iレセプター単離のためのcDNAは,ヒトosteosarcoma細胞(HOS)より,マウスレトロウイルスベクターを用いて作製した。このcDNAライブラリーをパッケージング細胞(BOSC;Kitamura et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92.1995)にトランスフェクトして得られる高力価ウイルスをHTLV-I感染に抵抗性のNIH3T3細胞に感染させ,上記のHTLV-Iエンベロープを有するHIVベクターを用いてHTLV-Iレセプターの単離を試みる。

研究成果

• [文献書誌] S.Sawada et al: "Disturbed CD4+T cell homeostasis and in vitro HIV-1 susceptibility in transgenic mice expressing T-tropic HIV-1 receptors" Journal of Experimental Medicine. (Accepted).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] S.Sawada, K.Gowrishankar, R.Kitamura, M.Suzuki, G.Suzuki, S.Tahara, and A.Koito: "Disturbed CD4+ T cell homeostasis and in vitro HIV-1 susceptibility in transgenic mice expressing T-tropic HIV-1 receptors" Journal of Experimental Medicine. (Accepted).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] 小糸 厚: "HV感染の分子機構" 医学のあゆみ(AIDS制圧に向けて). 176. 39-43 (1996)
• [文献書誌] A Koito et al.: "Small amino acid sequence changes within the V2 domain can affect the function of a T cell line-tropic human immunodeficiency virus type 1 envelope gp 120." Virology. 206. 878-884 (1995)
• [文献書誌] A Koito et al: "Functional role the V1/V2 region of human immunodeficiency virus type 1 envelope glycoprotein gp 120 in infection of primary macrophage and sCD4 neutralization." J.Virol.68. 2253-2259 (1994)
• [文献書誌] 小糸 厚: "HIV感染の分子機構" 医学のあゆみ. 176. 39-43 (1996)
• [文献書誌] Koito. A. et al: "Small amino acid sequence changes within the V2 domain can affect the function of a T-cell line-tropic human immunodeficiency virus type 1 envelope gp120." Virology. 206. 878-884 (1995)
• [文献書誌] Koito, A. et al: "Functional role of the V1/V2 region of human immunodeficiency virus type 1 envelope glycoprotein gp120 in infection of primary macrophage and sCD4 neutralization." Journal of Virology. 68. 2253-2259 (1994)