| 研究課題/領域番号 |
07F07452
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 外国 |
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| 研究分野 |
医用生体工学・生体材料学
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
原島 秀吉 北海道大学, 大学院・薬学研究院, 教授
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| 研究分担者 |
SHAHEEN Sharif 北海道大学, 大学院・薬学研究院, 外国人特別研究員
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| 研究期間 (年度) |
2007 – 2008
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| 研究課題ステータス |
完了 (2008年度)
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| 配分額 *注記 |
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
2008年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2007年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | 遺伝子デリバリー / 細胞内動態制御 / 量子ドット / FRET / MEND |
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| 研究概要 |
人工遺伝子ベクターのボトルネックとして、遺伝子発現効率の悪さが挙げられる。ウイルスベクターは発現効率が高いことが知られているが、その要因は主に、遺伝子の核移行後の発現効率にあることを明らかとした。遺伝子の核内動態を支配する要因としては、遺伝子のベクターからの脱凝縮化か大きく関与すると考えられる。そこで、細胞内、核内における脱凝縮化効率の定量化を試みるため、DNAを量子ドットでラベル化し、FRETの原理を用いて、脱凝縮化過程を解析した。蛍光プローブのローダミンラベル化ポリカチオンと量子ドットラベル化したDNAを凝縮する際の条件を最適化することで、効率的なFRETを検出できる条件を見出すことに成功した。また、本凝集コア粒子を搭載した多機能性エンベロープ型ナノ構造体(MEND)によって細胞内へ導入することにより、FRETの原理を用いて、核内の脱凝縮化過程を可視化し、脱凝縮化効率を定量的に評価することに成功した。さらに、核内の領域を核内DNAの染色像の強弱よりユークロマチン領域とヘテロクロマチン領域に分離し、各コンパートメントにおける脱凝縮効率を定量化することに成功した。現在本研究に関する論文の投稿準備を行っている。
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