| 研究課題/領域番号 |
08044228
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| 研究種目 |
国際学術研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 共同研究 |
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| 研究分野 |
内科学一般
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| 研究機関 | 旭川医科大学 |
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研究代表者 |
高後 裕 旭川医科大学, 医学部, 教授 (10133183)
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| 研究分担者 |
藤本 佳範 旭川医科大学, 医学部, 助手 (90292127)
蘆田 知史 旭川医科大学, 医学部, 助手 (50261409)
横田 欽一 旭川医科大学, 医学部, 講師 (10250573)
RICHARD Gall ハーバード大学, 医学部, Assistant
小野 稔 旭川医科大学, 医学部, 講師 (60185650)
GALLO Richard Harvard University, Medicine, Assistant Professor
GALLO Richa ハーバード大学, 医学部, Assistant
GALLO Richar Joint Program of Neonatology, ハーバード大学, assistant
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1997年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1996年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
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| キーワード | 抗菌ペプチド / PR-39 / シンデカン / 癌転移 / 細胞骨格 / rasシグナル / 内因性抗菌ペプチド |
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| 研究概要 |
我々とDr Richard Galloとの共同研究により以下のことが明かとなった.
1.内因性抗菌ペプチドPR-39のN末端から15のアミノ酸のオリゴペプチドを用いて,ウサギを免疫し,PR-39に対するポリクローナル抗体を作成した.
2.この抗体を用いてヒト白血球の蛋白を免疫沈降するとPR-39の大きさに相当する約5kDaのところにバンドが見られた.しかし,ブタPR-39のヒトでの類似蛋白および遺伝子はまだ発見できていない.
3.PR-39はproline richな部位にras signalingに重要であるSos蛋白が持つGrb2のSrc homology 3(SH3)domainへの結合motifを5回繰り返し有しており,SH3 domainに結合するという可能性が示唆された.そこでScr遺伝子のSH3 domainの蛋白をrecombinantで作成し,PR-39のオリゴペプチドを加え,PR-39に対する抗体で免疫沈降するとSH3 domainの蛋白が共沈し,逆にSH3 domainに対する抗体で免疫沈降するとPR-39が共沈してきた.以上のことより,PR-39はSH3 domainに結合すると考えられる.
4.PR-39遺伝子を肝癌細胞株に導入するとSyndecan-1の発現誘導とともに,細胞形態や浸潤能・細胞運動能に変化が起きた.この変化は,Dr Galloにより発表された,PR-39のSH3 domainへの結合能が関与していると考えられる.
5.PR-39遺伝子導入肝癌細胞はPR-39蛋白を培養液中に分泌した.
6.PR-39遺伝子をNIH3T3細胞のras transformantに導入するとやはり細胞形態の変化が認められ,また増殖能が著しく低下した.
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