ホルモン依存性プログラム細胞死の癌治療への応用

• 研究課題/領域番号: 08267201
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: (財)大阪バイオサイエンス研究所 (1997); 京都大学 (1996)
• 研究代表者: 垣塚 彰 (財)大阪バイオサイエンス研究所, 第4研究部, 部長 (80204329)
• 研究期間 (年度): 1997
• 研究課題ステータス: 完了 (1997年度)
• 配分額: 33,000千円 (直接経費: 33,000千円); 1997年度: 18,000千円 (直接経費: 18,000千円); 1996年度: 15,000千円 (直接経費: 15,000千円)
• キーワード: 癌 / 遺伝子治療 / アポトーシス / 前立腺癌 / 遺伝子発現 / デスドメイン / ポリグルタミン / レチノイン酸 / Fas / 融合蛋白質 / 急性前骨髄球性白血病 / エストロゲン

研究概要

本研究は、癌の新しい治療戦略の開発を目指した基礎研究であり、本年度は以下の成果を得た。
(1)アポトーシス誘導システムの開発:
これまでに、Fas受容体のデスドメインとエストロゲン受容体のエストロゲン結合領域の融合蛋白質を介して、エストロゲン依存性にアポトーシスを誘導するシステムの開発に成功してきた。このシステムは、特に肝癌・膵癌細胞に効率よくアポトーシスを誘導することが判明した。種々の癌細胞で、上記システムの感受性を検討したところ、fasのデスドメインに誘導されるアポトーシスシグナルに抵抗性を示す癌細胞の存在が明らかになったが、そのような細胞でも、ポリグルタミンを発現させると、アポトーシスが効率よく誘導されることを明らかにした。ポリグルタミンは、我々が、デスドメイン以外のアポトーシス誘導物質として、神経細胞のアポトーシスの解析から見いだしたものである。
(2)癌細胞特異的な遺伝子発現システムの開発:
前立腺癌に特異的に外来遺伝子を発現させる目的で、前立腺特異抗原(Prostate Specific Antigen)の遺伝子を単離し、前立腺、特に前立腺癌で特異的に遺伝子発現を誘導する遺伝子領域を同定することに成功した。この領域の支配下に転写活性化因子を発現させることによって、前立腺癌での特異性を維持したまま、外来性遺伝子を大量に発現させるシステムを構築する事ができた。一方、肝癌特異的に遺伝子を発現させるためにalpha fetoprotein等の肝癌に特異的に働くと報告されている遺伝子領域を単離し、実際にこれらの領域を使って、肝癌特異的な遺伝子発現系の構築も進行中である。

研究成果

• [文献書誌] Hasumoto,K.,et al.: "Association of expression of mRNA encoding the PGF2α receptor with luteal cell apoptosis in ovaries of pseudopregnant mice." J.Reproduction Fertiltily. 109. 45-42 (1997)
• [文献書誌] Suzuki,F.,et al.: "Cloning,functional expression and tissue distribution of rabbit α1d-adrenoceptor." Bioch.et Biophy.Acta. 11323. 6-11 (1997)
• [文献書誌] Kawaguchi,Y.,et al.: "Expression of Fas-estrogen receptor fusion protein induces cell death in pancreatic cancer line." Cancer Letter. 116. 53-59 (1997)
• [文献書誌] Watanabe,N.,et al.: "p140mDia,a mammalian homolog og Doroshophila diaphanous,is a target protein for Pho small GTPas and is a ligand for profilin." EMBO J.16. 3044-3056 (1997)
• [文献書誌] Hasumoto,K.,et al.: "Characterization of the mouse prostaglandin F receptor gene : a transgenic mouse study of a regulatory region taht controls its expression in the stomach and kidney but not in the ovary." Genes to Cells. 2. 571-580 (1997)
• [文献書誌] Nakamoto,M.et al.: "A CAG/CTG expansion in the normal population." Nat.Genet.17. 385-386 (1997)
• [文献書誌] Kakizuka,A.: "Degenerative ataxias : pathogenesis,genetics,and disease models." Cur.Opin.Neurol.10. 285-290 (1997)
• [文献書誌] Kakizuka,A.: "Unravelling of physiological functions of retinoic acid using a dominant-negative retinoic acid receptor." Leukemia (supplement). 11. 378-379 (1997)
• [文献書誌] Saitou,M.,et al.: "Use of transgenic mice to eliminate retinoic acid receptor function in specific tissues." Method.Enzymol.(印刷中).
• [文献書誌] Wellington,C.L.,et al.: "Caspase Cleavage of gene products assocated with triplet expansion disorders generates truncated fragments containing the polyglutamine tract." J.Biol.Chem.(印刷中).
• [文献書誌] Nakamoto,M.,et al.: "Genetic and Molecular Studies of Machado-Joseph Disease. In Genetic Instabilities and Hereditary Neurological Diseases." eds.Wella,R.D.and Warren,S.T. (Academic Press, San Diego) (印刷中),
• [文献書誌] Watanabe,G.,et al.: "Protein Kinase N (PKN9 and PKN‐related protein rhophilin as targets of the small GTP ase Rho." Science. 271. 645‐648 (1996)
• [文献書誌] Hirata,T.,et al.: "Two thromboxane A2 receptor isoforms in human platelets : Opposite coupling to adenylyl cyclase with different sensitivity to Arg^<60> to Leu mutation." J.Clin.Inv.97. 949‐956 (1996)
• [文献書誌] Isizaki,T.,et al.: "The small GTP‐binding protein Rho binds to and activates a 160 kDa Ser/Thr protein kinase homologous to myotonic dystrophy kinase." EMBOJ.15. 1885‐1893 (1996)
• [文献書誌] Ikeda,H.,et al.: "Expanded poly‐glutamine in the Machado‐Joseph disease protein induces cell death in vitro and in vivo." Nature Genet.13. 196‐202 (1996)
• [文献書誌] Early,E.,et al.: "Transgenic expression of PML‐RARa impairs myelopoiesis." Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.93. 7900‐7904 (1996)
• [文献書誌] Takebayashil,H.et al.: "Hormone‐induced Apoptosis by Fas‐nuclear Receptor Fusion Proteins : Novel Biological Tools for Controlling Apoptosis in vivo." Cancer Res.56. 4164‐4170 (1996)