研究課題/領域番号 |
08274211
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研究種目 |
重点領域研究
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配分区分 | 補助金 |
研究機関 | 大阪大学 |
研究代表者 |
益谷 央豪 大阪大学, 細胞生態工学センター, 助手 (40241252)
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研究期間 (年度) |
1996
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研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1996年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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キーワード | ヌクレオチド除去修復 / 色素性乾皮症 / XPC / HHR23B |
研究概要 |
XPC-HHR23B複合体の機能を明らかにするために、それぞれの組み換え蛋白質を作成した。XPCとHHR23Bを含まない細胞抽出液を用いた無細胞系を構築して解析した結果、XPC単独では弱い修復反応しか行われず、HHR23Bの存在下で活性が促進された。HHR23Bの欠失細胞は、これまでのところ知られていないので、本研究により始めて、HHR23BのNERへの関与が示された。HHR23Bの様々な欠失変異蛋白質を作成し、XPCとの結合領域およびNERに必要な領域を調べたところ、XPC結合能をもつもののみがNER反応を促進した。このことから、HHR23BはXPCとの結合を介してNERに関与していることが示された。しかし、HHR23BのXPC結合領域以外の欠失は、NERへの影響が少なく、HHR23BがNER以外の機能をもつことを示唆しており、現在さらに解析を進めている。XPC-HHR23B複合体は、強いDNA結合能をもち、ゲルシフト法およびBIAcoreシステムを用いた結果から、一本鎖DNA<二本鎖DNA<UV照射した二本鎖DNAに結合した。UV照射DNAへの親和性は、組み換えXPC単独ではほとんど見られず、HHR23Bの共存下でのみ検出された。この結果より、XPC-HHR23Bは、複合体として染色体DNA損傷の認識を行う可能性が示唆された。現在、これらの解析に加え、XPC-HHR23Bの細胞内の挙動についても解析を進めている。
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