情報伝達とリンパ球の機能分化

• 研究課題/領域番号: 08282105
• 研究種目: 特定領域研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: (財)癌研究会
• 研究代表者: 宮園 浩平 財団法人 癌研究会, 癌研究所・生化学部, 部長 (90209908)
• 研究分担者: 成内 秀雄 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10012741) ; 渡邊 武 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (40028684) ; 田賀 哲也 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (40192629) ; 吉村 昭彦 久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (90182815) ; 徳久 剛史 千葉大学, 医学部, 教授 (20134364) ; 宮島 篤 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (50135232) ; 菅村 和夫 東北大学, 医学部, 教授 (20117360)
• 研究期間 (年度): 1996 – 1999
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 170,700千円 (直接経費: 170,700千円); 1999年度: 40,800千円 (直接経費: 40,800千円); 1998年度: 40,200千円 (直接経費: 40,200千円); 1997年度: 40,200千円 (直接経費: 40,200千円); 1996年度: 49,500千円 (直接経費: 49,500千円)
• キーワード: サイトカイン / シグナル伝達 / リンパ球 / STAT / 増殖抑制 / 抗原受容体 / アポトーシス / 免疫異常 / 免疫病 / レセプター / 情報伝達 / 細胞増殖

研究概要

1.TGF-βはBリンパ球に作用してIgAの産生を促進する。一方PEBP2ファミリーの転写因子のうちPEBP2αCもBリンパ球の分化に関与している。本研究でSmad3とPEBP2αCが細胞内で結合することを示した。またIgCαのプロモーター領域にPEBP2とSmadの結合領域があり、Smad3がPEBP2αCと協調して転写活性を促進し、TGF-βの核内のターゲットとしてPEBP2が作用していることを明らかにした。
2.IL-6依存性に増殖するハイブリドーマMH60細胞にBMP2を添加するとIL-6存在下にアポトーシスによる細胞死を誘導することが明らかとなった。このアポトーシスはTAK1キナーゼの上昇の結果、p38MAPキナーゼが活性化されるためであることが確認された。また抑制型SmadであるSmad6はBMP2によるアポトーシスを抑制した。
3.メモリーB細胞の分化に関与する転写因子BCL6の活性がヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)の阻害剤であるトリコスタチンAによって消失することを明らかにした。BCL6はHDACをリクルートし、BCL6を発現している細胞にトリコスタチンAを加えるとアポトーシスが起こらなくなることから、HDACを介してメモリーB細胞にアポトーシスを誘導していることが明らかとなった。
4.サイトカインの機能を負に調節する因子CIS1のトランスジェニックマウスを作成した。このマウスのリンパ球はIL-2の反応が弱いなどさまざまな表現型を示し、STAT5aとSTAT5bのノックアウトマウスと極似しており、CIS1がSTAT5の作用を個体レベルで抑制していることが証明された。

研究成果

• [文献書誌] Miyazono, K., ten Dijke, P., and Heldin, C.-H.: "TGF-b signaling by Smad proteins"Adv. Immunol.. (in press). (2000)
• [文献書誌] Hanai, J.-i., Miyazono, K., Ito, Y.et al.: "Interaction and functional cooperation of PEBP2/CBF wuth Smads : Synergistic induction of the immunoglobulin germline Ca promoter"J. Boil. Chem.. 274. 31577-31582 (1999)
• [文献書誌] Nakashima, K., Miyazono, K., Taga, T.et al.: "Synergistic signaling in fetal brain by STAT3-Smad1 complex bridged by p300"Science. 284. 479-482 (1999)
• [文献書誌] Nakashima, M., Sonoda, K., Watanabe, T.: "Inhibition of cell growth and induction of apoptotic cell death by the human tumor-associated antigen RCAS1"Nat. Med.. 5(8). 938-942 (1999)
• [文献書誌] Matsumoto, A., Yamada, S., Yoshimura, A.et al.: "Suppression of STAT5 functions in liver, mammary glands, and T cells in cytokine-inducible SH2-containing protein 1 transgenic mice"Mol. Cell. Boil.. 19. 6396-6407 (1999)
• [文献書誌] Hagiyama, H., Adachi, T., Tsubata, T.et al.: "Signaling through the antigen receptor of B lymphocytes activates a p53-independent pathway of c-Myc-induced apoptosis"Oncogene. 18. 4091-4098 (1999)
• [文献書誌] Saitoh,M., Nishitoh,H., Miyazono,K., et al.: "Mammalian thioreodxin is a direct inhibitor of apoptosis signal-regulating kinase(ASK)1" EMBOJ.17. 2596-2606 (1998)
• [文献書誌] Nishitoh,H., Saitoh,M., Miyazono,K., et al.: "ASK1 is essential for JNK/SAPK activation by TRAF2" Molecul.Cell. 2. 389-395 (1998)
• [文献書誌] Kawabata,M., Inoue,H., Miyazono,K., et al.: "Smad proteins exist as monomers in vivo and undergo homo-and hetero-oligomerization upon activation by serine/threonine kinase receptors" EMBOJ.17. 4056-4065 (1998)
• [文献書誌] Yagi,K., Goto,D., Miyazono,K., et al.: "Alternatively-spliced variant of Smad2 lacking exon3 : Comparison with wild-type Smad2 and Smad3" J.Biol.Chem.274. 703-709 (1999)
• [文献書誌] Okabe,S., Fukuda,T., Tokuhisa,T.et al.: "BAZF, a novel Bcl6 homologue, functions as a transcriptional repressor" Mol.Cell.Biol.18. 4235-4244 (1998)
• [文献書誌] Yasukawa,H., Misawa,H., Yoshimura,A.et al.: "The JAK-binding protein JAB inhibits Janus tyrosine kinase activity through binding in the activation loop" EMBOJ.in press. (1999)
• [文献書誌] Imamura T., Takase,M., Miyazono,K., et al.: "Smad6 inhibits signalling by the TGF-β superfamily." Nature. 389・6651. 622-626 (1997)
• [文献書誌] Heldin,C.-H., Miyazono,K., and ten Dijke P.: "TGF-β signalling from cell membrane to nucleus via Smad proteins." Nature. 390・6659. 465-471 (1997)
• [文献書誌] Nakao,A., Imamura,T., Miyazono,K., et al.: "TGF-β receptor-mediated signalling through Smad2,Smad3 and Smad4." EMBO Journal. 16・17. 5353-5362 (1997)
• [文献書誌] Suzuki,Y., Watanabe,T. et al.: "HAX-1,a novel intracellular protein,localizes on mitochondria,directly associated with HS1,a substrate of Src-family tyrosine kinases." J.Immunol.158. 2736-2744 (1997)
• [文献書誌] Endo,T.A., Miyazaki,T., Yoshimura,A. et al.: "A new protein contaning an SH2 domain that inhibits JAK kinases." Nature. 387. 921-924 (1997)
• [文献書誌] Fukuda,T., Yoshida,T., Tokuhisa,T. et al.: "Disruption of the Bel6 gene results in an impaired germ inal center formation." J.Exp.Med.186. 439-448 (1997)
• [文献書誌] H.Ichijo,E.Nishida,K.Miyazono,et al.: "Induction of apoptosis by ASK1,a mammalian MAPKKK that activates SAPK/JNK and p38 signaling pathways." Science. 275. 90-94 (1997)
• [文献書誌] J.Wang,T.Koizumi,and T.Watanabe: "Altered antigen receptor signaling and impaired Fas-mediated apoptosis of B cells in Lyn-deficient mice." Journal of Experimental Medicine. 184. 831-839 (1996)
• [文献書誌] S.Souchelnytskyi,P.ten Dijke,K.Miyazono,et al.: "Phosphorylation of Ser165 in TGF-β type I receptor modulates TGF-β1-induced cellular responses." EMBO Journal. 15. 6231-6240 (1996)
• [文献書誌] T.Takeshita,T.Arita,K.Sugamura,et al.: "A new type of signal transducing adaptor molecule,STAM." Immunity. (印刷中).
• [文献書誌] K.Yoshida,T.Taga,M.Saito,et al.: "Targeted disruption of gp130,a common signal transducer for IL-6-family of cytokines,leads to myocardial and hematological disorders." Proceedings of National Academy of Sciences in USA. 93. 407-411 (1996)
• [文献書誌] A.L.-F.Mui,H.Wakao,A.Miyajima,et al.: "Suppression of interleukin-3-induced gene expression by a C-terminal truncated Stat5 : role of Stat5 in proliferation." EMBO Journal. 15. 2425-2433 (1996)