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GC含量の異なるアルファヘルペスウイルスにおける突然変異の比較研究

研究課題

研究課題/領域番号 08306017
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 基礎獣医学・基礎畜産学
研究機関東京大学

研究代表者

大塚 治城 (大塚 冶城)  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80261957)

研究分担者 遠矢 幸伸  鹿児島大学, 農学部, 助教授 (20180119)
松本 安喜  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (90251420)
見上 彪  帯広畜産大学, 原虫病分子免疫研究センター, 教授 (20091506)
山田 俊治  農林水産省, 家畜衛生試験場, 研究員
堀本 泰介  大阪府立大学, 農学部, 助教授 (00222282)
研究期間 (年度) 1996 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
5,000千円 (直接経費: 5,000千円)
1998年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1997年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
キーワードGC含量 / CHV / PrV / gB / デオキシヌクレオチド3リン酸 / プール / HPLC / BHV / デオキシヌクレオチド3燐酸 / 相同組み換え / BHV-1 / PRV / HSV-1 / チミジレキナーゼ / 糖タンパク / FHV / TK
研究概要

GC含量が極端に低い(約30%)イヌヘルペスウイルス(CHV)の環境下においてGC含量の高い遺伝子の発現を研究するために豚オーエスキー病ウイルス(PrV)のgB遺伝子(GC含量約70%)を組み込んだ組み換えCHVを構築した。PrVgB遺伝子のプロモーターはCHVに組み込まれた状態でも機能し、転写、翻訳されPrVのgB様の糖タンパクを発現した。CHVによって発現されたPrVgBは感染細胞の表面にtransportされ、それに対して作成されたマウス抗体はPrVを中和する活性を有していた。PrVgBはgBa,gBb,gBbおよびgBcと呼ばれる3種のポリペプチドが非共有結合で複合体を形成しているが、CHVの発現するPrVgBも同じ構造を持つことが明らかになった。したがってPrV遺伝子はCHV環境下においてもPrV環境下でも全く同じ糖タンパクを発現するものと考えられた。
DNA合成時に極端なデオキシヌクレオチド3燐酸プールのアンバランスがあった場合、突然変異の起こる頻度が高まることが知られている。ヘルペスウイルスには極端にGC含量が低いもの(CHV)と極端に高いものヘルペスウイルスのゲノムのGC含量が極端に高いもの(PrV.BHV)が存在するが、ヘルペスウイルス複製時のデオキシヌクレオチド3燐酸プールのアンバランスがGC含量の増加あるいは減少への進化的圧力になることが考えられる。ウイルス感染時のデオキシヌクレオチド3燐酸のプールサイズのとゲノムのGC含量の相関関係の有無を研究するために、HPLC法によりdATP,dCTP,dGTP,dTTPのプ-ルサイズを測定した。MDCK細胞をPRV,BHVおよびCHVで感染させ、6時間後に感染細胞をPBSで洗浄し、過塩素酸にて抽出し、炭酸カリウムにて中和し、HPLCカラム(PEGASIL ODS.株式会社センシュ-科学)で分析した。PRVおよびCHV感染細胞中ではそれぞれのデオキシヌクレオチド3燐酸のプールサイズはコントロールと比して有意な差は見られなかったが、BHV感染細胞においてはdATPのプールがコントロールの2-3倍になっていた。したがって感染ヘルペスウイルスのゲノムのGC含量と感染細胞におけるデオキシ3燐酸プールには相関関係が存在しないことが明らかになった。

報告書

(4件)
  • 1998 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1997 実績報告書
  • 1996 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (18件)

  • [文献書誌] Xuan.X,Kojima,A.,Murata,T.Otsuka,H.: "Analysis of canine herpesvirus gB,gC and gD expressed by a recombinant and vaccinia virus"Arch.Virol. 142. 1003-1010 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Xuan.X.,Otsuka H.et al.: "Biological and immunogenic properties of rabies virus glycoprotein expressed by canine herpesvirus vector"Vaccine. 16. 969-976 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Xuan,X.Kojima,A.,Murata.T.Otsuka,H.: "Analysis of canine herpesvirus gB,gC and gD expressed by a recombinant and vaccinia virus"Arch.Virol. 142. 1003-1010 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Xuan,X.,Nishikawa,Y.,and Otsuka,H.: "Construction of canine herpesvirus vector expressing foreign genes using a lacZ-TK gene cassette:a double selection marker"Virus Genes. 17. 25-32 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishikawa,Y.,Xuan,X.,and Otsuka,H.: "Identification and characterization of the glycoprotein E and I genes of canine herpesvirus"Virus Res. 56. 77-92 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Horimoto,T.,and Kawaoka,Y.: "Apossible mechanism for selection of virulent avian influenza Aviruses in 14-day-old bryonated eggs"J.Clin.Microbiol. 35. 1661-1666 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Xuan, X, Kojima, A., Murata, T., and Otsuka, H.: "Analysis of canine herpesvirus gB, gC and gD expressed by a recombinant vaccinia virus."Arch. Virol.. 142. 1003-101 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Xuan, X., Tuchiya, K., Sato, I., Nishikawa, Y., Onodera, Y., Takashima, Y., Yamamoto, A., Katsumata, A., Iwata, A., Ueda, S., Mikami, T., and Otsuka, H.: "Biological and immunogenic properties of rabies virus glycoprotein expressed by canine herpesvirus vector."Vaccine. 16. 969-976 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Xuan, X., Nishikawa, Y., Takashima, Y., Tuchiya, K., Ueda, S., Yokoyama, N., Maeda, K., Mikami, T., and Otsuka, H.: "Construction of canine herpesvirus vector expressing foreign genes using a LacZ-TK gene cassette as a double selection marker."Virus Genes. 17. 25-32 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishikawa, Y., Xuan, X., and Otsuka, H.: "Identification and characterization of the glycoprotein E and I genes of canine herpesvirus."Virus Res.. 56. 77-92 (1998)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Horimoto, T., Takahashi, H., Sakaguchi, M., Horikoshi, K., Iritani, S., Kazamatsuri, H., Ikeda, K., and Tashiro, M.: "A reverse-type sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for detecting antibodies to Borna Disease Virus."J. Clin. Microbiol. 35. 1661-1666 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Horimoto, T., and Kawaoka, Y.: "A possible mechanism for selection of virulent avian influenza A viruses in 14-day-old embryonated eggs."J. Vet. Med. Sci.. 60. 273-275 (1998)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishikawa,Y.,Xuan,X.,and Otsuka,H.: "Identification and characterization of the glycoprotein E and l genes of canine herpesvirus" Virus Research. 56. 77-92 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Maeda,K.,Horimoto,T.,and Mikami,T.: "Properties and functions of feline herpesvirus type l glycoproteins" J.Vet.Med.Sci.60. 881-888 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Xuan,X., Nishikawa,Y.et al.: "Rapid ckonstruction of canine herpesvirus vector expressing foreign genes using a LacZ-TK gene cassette as a double selectional morker" Virus. (in press). (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Xuan,X.,Maeda,K.,Mikami,T.and Otsuka,H.: "Characterization of canine herpesvirus glycoprotein Cexpressed by recombinant baculovirus in isnsect cells" Virus Research. 46. 57-63 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Xuan,X.,Kojima,A.,Murata,T.,Mikami,T.,and Otsuka,H.: "Analysis of canine herpesvirus gB,gC and gD expressed by a recombinant vaocinia virus." Archives of Virology. 142(in press). (1997)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Yoshitake,N.,Xuan,X,and Otsuka,H.: "Identification and characterization of bovine herpesvirus-1 glycoproteins E and I." Journal of General Virology. (in press). (1997)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書

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公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

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