研究概要 |
最初に基礎的データを得る目的で、購入した2波長分光蛍光測光システム(CAM-230L型、日本分光)を用いて、化学構造式にアミノ基を有する標準の各種抗菌性物質(例えばPenicillin系の一部、Aminoglycoside.Sulfonamides)の2倍階段希釈液について、アミノ基標識用の蛍光誘導化剤のFluorescamineにより、蛍光発光の確認,最適な励起波長と測定波長の測定、最適反応時間、あるいは蛍光強度などを測定した。 次に、アミノ基を有する標準Ampicillin、Amoxicillin、Dihydrostreptomycin、Streptomycin、Kanamycin、Sulfamethazinの2倍階段希釈液を用いて、Bacillus subtilis ATCC-6633を試験菌とするペプトン・フリーの最小培地およびmueller-Hinton agar上にディスク法により阻止円を形成させ、その阻止円上にFluorescamine溶液を滴下後、分光蛍光測光システムにより、発光強度および測定限界値などを測定した。 さらに、上記のアミノ基を有する抗菌性物質およびアミノ基を有さない各種抗菌性物質(Chlortetracycline,Spectinomycin,Oxolinic Acid,Penicillin-G)を用いていて、アミノ基標識用(Fluorescamine)、あるいはカルボン酸標識用(4-bromomethyl-7-methoxycoumarin)の蛍光ラベル化剤を用いて、上記と同様の実験を行った。さらに、分光蛍光測光のin vitro型ファイバーユニットシステムを購入して、牛の肝臓、腎臓、血清、牛乳などに既知抗菌性物質を一定量添加後、本法による測定条件や測定限界値などの検討を行った。最終的に、in vitro型の2波長分光蛍光測光システムを用いる、畜産物中の残留抗菌性物質の新検査法を確立した。
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