研究概要 |
実験1.ヒト腸骨骨髄より抽出した骨原細胞の骨芽細胞形質の検討 ヒト腸骨骨髄より抽出した骨原細胞における骨芽細胞分化マーカー遺伝子(Alkaline Phosphatase,Type I Collagen,Type III Collagen,Osteopontin,Osteocalcin,PTH/PTHrP receptorのmRNA)とヒトBone Morphogenetic Protein(BMP)1〜7mRNAの発現をRT-PCRにて検討した。その結果、骨原細胞の数は年齢と共に減少する。この骨原細胞は増殖・分化し骨芽細胞としての形質を示す。すなわちALP,Collagen、Osteocalcin、PTH/PTHrPの遺伝子発現を認め、骨芽細胞への分化能を有すことを証明した。さらにBMPmRNAの発現から骨髄内骨原細胞の骨芽細胞への分化にBMPが関与している可能性が示唆された。 実験2.骨原細胞の選択的分離と新鮮骨原細胞移植による臨床への応用の検討 比重遠心分離にて骨原細胞を選択的に抽出できることを生化学的、遺伝子学的に確認した。培養過程を経ない新鮮ヒト骨原細胞をフィブリン糊などの担体とともにヌードマウスに移植し、移植されたヒト骨原細胞の新生骨軟骨形成への直接的な関与をin situ hybridizationを用いて経時的にその変化を検討した。
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