| 研究課題/領域番号 |
08457486
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
機能系基礎歯科学
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
春日井 昇平 東京医科歯科大学, 歯学部, 助教授 (70161049)
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| 研究分担者 |
飯村 忠浩 東京医科歯科大学, 歯学研究科, 助手 (20282775)
大井田 新一郎 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (10114745)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
6,900千円 (直接経費: 6,900千円)
1997年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1996年度: 5,300千円 (直接経費: 5,300千円)
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| キーワード | 歯根膜 / S100A4 / cDNAクローニング / カルシウム / メカニカルストレス / 石灰化 / S100 |
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| 研究概要 |
最初に、ウシ歯根膜組織のcDNAライブラリーを作製した。次に、歯根膜組織と頭蓋骨の間で発現している遺伝子の引き算をおこない、歯根膜組織のcDNAライブラリーを用い歯根膜組織に特異的に発現している遺伝子のクローニングを試みたが成功しなかった。咬合力によるメカニカルストレスにさらされている歯根膜組織がその機能を維持するためには、歯根膜細胞のCaシグナルと細胞骨格系が重要な役割を果たしている可能性が考えられる。S100A4は細胞骨格との相互作用が報告されているカルシウム結合タンパクの一つでありる。歯根膜細胞cDNAライブラリーより、ウシS100A4遺伝子のクローニングをおこなった。他の口腔組織に比較すると歯根膜組織のS100A4の発現レベルは高く、また萌出した歯の歯根膜組織におけるこの遺伝子の発現レベルは、未萌出の歯の歯根膜組織における発現レベルに比較すると著しく高かった。さらに、培養ウシ歯根膜細胞にメカニカルストレスを負荷するとS100A4の遺伝子発現量の増加が観察された。したがって、S100A4の遺伝子の発現量がメカニカルストレスにより制御されている可能性が考えられる。S100A4の抗体を用いた歯根膜組織の免疫組織学的観察結果、培養歯根膜細胞の培地のWestern blottingの結果、アイソトープ標識した培地の分析結果から、歯根膜細胞がS100A4を分泌している可能性が示唆された。培養骨芽細胞は骨様の石灰化組織を形成するが、この培養系に2100A4リコンビナントタンパクを添加すると石灰化の抑制が起きた。ラットの頭蓋骨の発生の初期におてはS100A4の発現が観察されたが、頭蓋骨の石灰化開始時期にはS100A4の発現が消失しており、またin situ Hybridizationにおいて大部分の骨芽細胞にはS100A4の遺伝子発現が観察されなかった。したがって、S100A4は石灰化に対しては抑制的な因子として働いている可能性が推測できる。以上の実験結果より、S100A4の発現がメカニカルストレスにより制御されること、歯根膜細胞はS100A4を分泌すること、そして分泌されたS100A4は石灰化の抑制因子として作用する可能性が示唆された。
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