| 研究課題/領域番号 |
08458234
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
細胞生物学
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| 研究機関 | 愛知県がんセンター |
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研究代表者 |
稲垣 昌樹 愛知県がんセンター研究所, 生化学部, 部長 (30183007)
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| 研究分担者 |
稲垣 直之 愛知県がんセンター研究所, 生化学部, 室長 (20223216)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
6,000千円 (直接経費: 6,000千円)
1997年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
1996年度: 4,300千円 (直接経費: 4,300千円)
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| キーワード | 中間径フィラメント(IF)蛋白質 / IFの細胞機能 / リン酸化反応 / リン酸化ペプチド抗体群 / CFキナーゼとRhoキナーゼ / 細胞周期 / 細胞質分裂 / 中間径フィラメント / キナーゼ / リン酸化ペプチド抗体 / 低分子量GTP結合蛋白質 / 蛋白質リン酸化反応 |
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| 研究概要 |
我々はグリア細胞の中間径フィラメント蛋白質であるGFAPの、各々の部位のリン酸化状態を特異的に認識する抗体群を作製することにより、細胞質分裂期に分裂溝の近傍に限局して活性化するプロテインキナーゼ(以下CFキナーゼ)を見出した。今回、このCFキナーゼと低分子量GTP結合蛋白質Rhoの標的蛋白質の1つであるRhoキナーゼとの相同性について検討し、興味深い知見を得た。
in vitroにおいて、RhoキナーゼはGTP結合型Rho依存生にGFAPおよびビメンチンを強くリン酸化し、これらのリン酸化はフィラメント形成の阻害を引き起こした。そして今回作製したものも含めた、計11種類の抗リン酸化抗体を用いてWesterm hlot及び細胞染色を行った結果、RhoキナーゼによるGFAP及びビメンチンのin vitroでのリン酸化部位が、CFキナーゼによるin vivoでのリン酸化部位と完全に一致することが判明した。また抗Rhoキナーゼ抗体を作製し、これを用いて細胞染色を行った結果、Rhoキナーゼの細胞質分裂期に分裂溝への顕著な集積が観察された。以上の結果から、細胞質分裂期において活性化されるCFキナーゼがRho-キナーゼであることが強く示唆された。
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