| 研究課題/領域番号 |
08458241
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
発生生物学
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| 研究機関 | 国立遺伝学研究所 |
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研究代表者 |
中辻 憲夫 国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 教授 (80237312)
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| 研究分担者 |
白吉 安昭 鳥取大学, 医学部, 助教授 (90249946)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
6,300千円 (直接経費: 6,300千円)
1997年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
1996年度: 3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
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| キーワード | マウス / 生殖細胞 / 性分化 / 減数分裂 / 精巣 / 卵巣 / 細胞培養 / 始原生殖細胞 / 胎仔生殖細胞 / EC細胞株 / 遺伝子導入 / アポトーシス / 配偶子分化 |
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| 研究概要 |
マウス胚の始原生殖細胞は胚後部の尿膜基部に出現した後に生殖巣原基へ移動し、更に卵巣或いは精巣原基内で各々、卵子や精子形成へ向った分化を行なう。この研究課題では、未分化胚細胞から始原生殖細胞への決定、始原生殖細胞の増殖制御、生殖巣原基への移動、そして増殖の停止と雌雄配偶子形成へ向った細胞分化という、胎仔生殖細胞の一連の重要な現象の機構解明の研究を前進させることを目的として、次のような研究を行なった。
性分化開始時期以降の生殖細胞については、これまでの培養実験系では細胞死が起きてしまい、この重要な時期の生殖細胞と体細胞の相互作用などを解析するための実験系は未だに存在しない。我々は11日齢までの胎子の性判別法、生殖細胞を抗体-磁気ビーズ法により単離する方法、生殖細胞を蛍光色素により生体ラベルする方法、生殖細胞と体細胞との凝集塊を作成する方法、減数分裂期の細胞を抗体によって検出する方法を改良した。これらの結果培養下で減数分裂に入る、つまり卵母細胞へと分化する生殖細胞を検出することに成功した。
一方、13.5日齢胎仔雌雄生殖巣間での遺伝子発現の差を指標に性分化に関与する新規遺伝子、機能分子の単離を行った結果、これまでに新規遺伝子を多数同定した。これらの中でも新規な転写因子、nephgonadinについてさらに解析を進め、その時間的、空間的な発現パターン等を詳細に調べた。nephgonadinの発現は、生殖巣においては13.5日胎仔雄生殖巣で非常に強い発現が認められるのに対して雌生殖巣では発現が弱く、このような発現パターンは18.5日齢胎仔まで継続した。精巣では出生後発現量が時間を経過するに従って減少し、5週齢精巣ではかろうじて発現を検出できるレベルになった。これとは対照的に、卵巣での発現は出生後1週から2週目にかけて胎児期と同様に弱い発現が続いたが、2週目から3週目にかけて発現量が増加し4週目にその発現のピークを迎えることが明らかとなった。すなわち、精巣と卵巣での発現量は、生後2週目から3週目にかけて逆転することが観察された。このようにnephgonadinは、性依存的な発現パターンを示し、雌雄性分化、生殖巣形成において機能分子として働いている可能性が大きい。
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