細胞膜内の情報変換分子集合領域の解析

• 研究課題/領域番号: 08459016
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 広領域
• 研究機関: 京都工芸繊維大学
• 研究代表者: 前川 昌平 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助教授 (40173695)
• 研究期間 (年度): 1996 – 1998
• 研究課題ステータス: 完了 (1998年度)
• 配分額: 7,500千円 (直接経費: 7,500千円); 1998年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円); 1997年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円); 1996年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
• キーワード: 神経細胞 / 細胞膜 / ラフト / コレステロール / GPI-アンカー / カルモジュリン / パラレミン / NAP-22 / 神経 / Gタンパク質 / タンパク質キナーゼ / 細胞接着因子 / 情報伝達 / 脳 / GPI-アンカー蛋白質 / シナプス / チロシンリン酸化

研究概要

脳組織を材料に細胞膜中の情報変換分子集合領域(ラフト)の解析を行い以下の知見を得た.
1. 主要成分についてはアミノ酸配列決定によるタンパク質同定,並びに特異抗体を用いた免疫ブロット法によりその同定を行ない,チューブリン,アクチン,NAP-22,GAP-43,Gタンパク質の存在を示した.
2. グリコシルフォスファチジルイノシトールアンカー(GPI)-アンカー型タンパク質については,F3/コンタクチン,T-カドヘリン,OBCAM,ニューロトリミンといった諸タンパクが濃縮されていることをみいだしたが,加えて新規のタンパク質の存在を見い出し,これをクローニングし,キロン(kilon)と命名した.
3. またラフト画分を抗原に種々のモノクローン抗体の作製を行い,ラフトに局在するタンパク質の発見を試みた結果,1つの局在タンパク質を発見しこれをパラレミンと同定した.
4. ラフトの脂質分析を行い,フォスファチジルコリンとコレステロールが濃縮されていることを見い出した.更にコレステロールの特異的抽出により,神経特異タンパク質NAP-22が特異的に可溶化することを見い出した.さらにNAP-22とコレステロール含有リポソームとの結合がカルモジュリンによって阻害されることを見い出した.

研究成果

• [文献書誌] 前川昌平 他: "Identification of NAP-22 and GAP-43(neuromodulin)as major protein components in a Triton insoluble low density fraction of rat brain." Biochim.Biophys.Acta. 1323. 1-5 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 山本幸稔 他: "Biochemical evidence for the presence of NAP-22, a novel acidic calmodulin binding protein, in the synaptic vesicles of rat brain." Neurosci.Lett.224. 127-130 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 飯野 哲 他: "Immunohistochemical localization of a novel acidic calmodulin binding protein, NAP-22, in the rat brain." Neuroscience. 発表予定. (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 前川昌平: "脳・神経系細胞膜中の界面活性剤不溶性低比重画分" 神経化学. 36. 31-35 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 船津宣雄 他: "Characterization of a novel rat brain GPI-anchored protein(kilon), a member of the IgLON cell adhesion molecule family." J.Biol.Chem.発表予定.
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 前川昌平: "ブレインサイエンス'97(佐藤昌康/編)" 講談社, 11 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Maekawa, S., Kumanogoh, H., Funatsu, N., Takei, N., Inoue, K., Endo, Y., Hamada, K., and Sokawa, Y.: "Identification of NAP-22 and GAP-43 (neuromodulin) as major protein components in a Triton insoluble low density fraction of rat brain." Biochimica Biophysica Acta. 1323. 1-5 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Yamamoto, Y., Sokawa, Y., and Maekawa, S.: "Biochemical evidence for the presence of NAP-22, a novel acidic calmodulin ibnding protein, in the synaptic vesicles of rat brain." Neurosci.Lett.224. 127-130 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] lino, S., Kobayashi, S., and Maekawa, S.: "Immunohistochemical localization of a novel acidic calmodulin-binding protein, NAP-22, in the rat brain" Neuroscience. (in press). (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Funatsu, N., Miyata, S., Kumanogoh, H., Shigeta, M., Hamada, K., Endo, Y., Sokawa, Y., and Maekawa, S.: "Characterization of a novel rat brain GP1-anchored protein (kilon), a member of the lgLON Cell adhesion molecule family" J.Biological Chemistry. (in press). (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] 飯野哲 他: "Immunohistochemical localization of a novel acidic calmodulin binding protein,NAP-22,in the rat brain." Neuroscience. (発表予定). (1999)
• [文献書誌] 船津宣雄 他: "Characterization of a novel rat brain GPI-anchored protein(kilon),a member of the IgLON cell adhesion molecule family." J.Biol.Chem.(発表予定). (1999)
• [文献書誌] 前川昌平, 他: "Identification of NAP-22 and GAP-43 (neuromodulin) as major protein components in a Triton insoluble low density fraction of rat brain." Biochimica Biophysica Acta. 1323. 1-5 (1997)
• [文献書誌] 久保田真理, 他: "Localization of 2',5'-oligoadenylate synthetase and the enhancement of its acttivity with recombinant interferon-aA/D in the mouse brain." Anal.Embryol.195. 251-257 (1997)
• [文献書誌] 山本幸稔, 他: "Biochemical evidence for the localization of NAP-22,a novel calmodulin binding protein,in the synaptic vesicles of rat brain." Neuroscience Letters. 224. 127-130 (1997)
• [文献書誌] 久保田真理, 他: "The target cells of injected type I interferons in mouse liver." J.Cytokine and Interferon Res.(in press.). (1998)
• [文献書誌] 上田哲生, 他: "Production of Immunoreactive 2',5'-oligoadenylate Synthase in p48-deficient Mice." J.Cytokine and Interferon Res.(in press.). (1998)
• [文献書誌] 前川昌平,他: "Identification of NAP-22 and GAP-43(neuromodulin)as major protein conponents in a Triton insoluble lowdensityfraction of rat brain." Biochimica Biophysica Acta. 1323. 1-5 (1997)
• [文献書誌] 久保田真理,他: "Localization of 2′,5′-oligoadenylate synthetase and the enhancement of its acttivity with recombinant interferon-α A/D in the mouse brain." Anal.Embryol.(in press).
• [文献書誌] 山本幸稔,他: "Biochemical evidence of the localization of NAP-22,a novel calmodulin binding protein,in the synaptic vesicles of rat brain." Neuroscience Letters. (in press).