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トランスジェニック海産無脊椎動物作成へ向けての細胞培養法と発現ベクターの開発

研究課題

研究課題/領域番号 08558080
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 発生生物学
研究機関広島大学

研究代表者

嶋田 拓  広島大学, 理学部, 教授 (70011559)

研究分担者 町井 昭  (株)山勝真珠, 養殖研究室, 顧問研究員
淡路 雅彦  水産庁中央水産研究所, 生物機能部・分子生物研究室, 室長
和田 克彦  水産庁養殖研究所, 遺伝育種部, 部長
中坪 敬子  広島大学, 理学部, 助手 (40192760)
赤坂 甲治  広島大学, 理学部, 助教授 (60150968)
MASAHIKO Awaji  National Research Institute of Fisheries Science, Investigator
小林 敬典  水産庁養殖研究所, 研究員
研究期間 (年度) 1996 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
19,800千円 (直接経費: 19,800千円)
1998年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
1997年度: 4,900千円 (直接経費: 4,900千円)
1996年度: 10,500千円 (直接経費: 10,500千円)
キーワードウニ / アコヤガイ / トランスジェニック動物 / インスレーター / 発現ベクター / 細胞培養 / 遺伝子導入 / 遺伝子組換え / バフンウニ / 遺伝子 / 転写調節 / 転写因子
研究概要

1. ウニ遺伝子の発現調節に関わるシスエレメントの検索
バフンウニArS遺伝子の転写開始点近傍の上下流にいくつかのシスエレメントを見出した 。上流-168bp〜-162bpにはSox因子が結合して転写を促進し、-186bp付近には転写抑制シスエレメントが見つかった。骨片形成に係わるSM30遺伝子は、一次間充織細胞の分化に係わるEts蛋白質によって制御されることもわかった。
2. 遺伝子導入におけるインスレーターのテスト
Ars遺伝子で見出したインスレーター配列は、ショウジョウバエ、マウス、ヒト細胞でもインスレーター活性を示すことが、インスレーターを組み込んだ融合遺伝子の導入実験によってわかった。
3. アコヤガイ外套膜細胞の培養
好適な培養条件を確立したが、初代培養にとどまっており、トランスフォームすることには成功しなかった。
4. ウニ培養細胞系の作成
プルテウス幼生細胞から初代細胞培養系を作ることを試み、ほぼ成功したが、かび類の増殖を完全に抑制することが難しく3日以上培養できなかった。

報告書

(4件)
  • 1998 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1997 実績報告書
  • 1996 実績報告書
  • 研究成果

    (30件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (30件)

  • [文献書誌] Ishii et al: "Hbox1 and Hbox7 are involved in the Pattern Formation of Sea urchin Embryo" Development Growth & Differentiation. 41印刷中. (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kurokawa,et al: "HpEts,an ets-related transcription factor implicated in primary mesenchyme cell differentiation of the sea urchin embryo" Mechanism of Development. 80. 41-52 (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawasaki,et al: "Lim1-related homeobox gene(HpLim1) expressed in sea urchin embryo" Development Growth&Differentiation. 41印刷中. (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kiyama et al: "Structure and function of a sea urchin orthodenticle-related HpOtx gene" Developmental Biology. 193. 139-145 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mitsunaga-Nakatsubo et al: "Differential expression of sea urchin Otx isoform (HpOtxE and HpOtxL) mRNA during early development" International Journal of Developmental Biology. 42. 645-651 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mitsunaga-Nakatsubo et al: "Arylsulfatase exists as non-enzymatic cell surface protein in sea urchin embryos" Journal of Experimental Zoology. 280. 220-230 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Ishii, et al.: "Hbox1 and Hbox7 are involved in the Pattern Formation of Sea urchin Embryo" Dev.Growth & Differ.41(in press). (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] D.Kurokawa, et al.: "HpEts, an ets-related transcription factor implicated in primary mesenchyme cell differentiation of the sea urchin embryo." Mech.Dev.80. 41-52 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kawasaki, et al.: "Liml-related homeobox gene (HpLim 1) expressed in sea urchin embryo" Dev.Growth & Differ.41(in press). (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kiyama, et al.: "Structure and function of a sea urchin orthodenticle-relatedHpOtxgene." Dev.Biol.193. 139-145 (1998)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Mitsunaga-Nakatsubo, et al.: "Differential expression of sea urchin Otx isoform (HpOtxE and HpOtxL) mRNA during early development." Int.J.Dev.Biol.42. 645-651 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Mitsunaga-Nakatsubo, et al.: "Arylsulfatase exists as non-enzymatic cell surface protein in sea urchin embryos." J.Exp.Zool.280. 220-230 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ishii et al: "Hboxl and Hbox7 are involved in the Pattern Formation of Sea urchin Embryo" Development Growth & Differentiation. 41 (印刷中). (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kurokawa,et al: "HpEts,an ets-related transcription factor implicated in primary mesenchyme cell differentiation of the sea urchin embryo" Mechanism of Development. 80. 41-52 (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kawasaki,et al: "Liml-related homeobox gene (HpLiml) expressed in sea urchin embryo" Development Growth & Differentiation. 41 (印刷中). (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kiyama et al: "Structure and function of a sea urchin orthodenticle-related HpOtx gene" Developmental Biology. 193. 139-145 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Mitsunaga-Nakatsubo et al: "Differential expression of sea urchin Otx isoform (HpOtxE and HpOtxL) mRNA during early development" International Journal of Developmental Biology. 42. 645-651 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Mitsunaga-Nakatsubo et al: "Arylsulfatase exists as non-enzymatic cell surface protein in sea urchin embryos" Journal of Expermintal Zoology. 280. 220-230 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] N.Sakamoto: "Two isoforms of orthodenticle-related proteins (HpOtx)bind to the enhancer element of sea urchin arylsulfatase gene." Developmental Biology. 181. 284-295 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Koji Akasaka: "Oral-aboral ectoderm differentiation of the sea urchin embryos is disrupted in response to calcium ionophore." Development Growth and Differentiation. 39. 373-379 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Junji Morokuma: "A cis-regulatory element within the 5′ flanking region of arylsulfatase gene of sea urchin,Hemicentrotus pulcherrimus." Development Growth and Differentiation. 39. 469-476 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Daisuke Kurokawa: "Cloning of cyclin E cDNA of the sea urchin,-Hemicentrotus pulcherrimus." Zoological Science. 14. 791-794 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] K.Mitsunaga-Nakatsubo: "Arylsulfatase exists as non-enzymatic cell surface protein in sea urchin embryos." Journal of Experimental Zoology. 280. 220-230 (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] T.Kiyama: "Structure and function of a sea urchin orthodenticle-related HpOtx gene." Developmenttal Biology. 193. 139-145 (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Sakamoto et al.: "A triplex DNA configuration of the polypyrimidine : polypurine stretch in the 5' flanking region of the sea urchin arylsulfatase gene." Zoological Science. 13. 105-109 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Harada et al: "Spatial expression of a forkhead homologue in the sea urchin embryo." Mechanism of Development. 60. 163-173 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Mitsunaga-Nakatsubo et al: "cDNA cloning of Na+, K+-ATPase alpha subunit from embryos of the sea urchin, Hemicentrotus pulcherrimus." Zoological Science. 13. 833-841 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Sakamoto et al: "Two isoforms of orthodenticle-related proteins (HpOtx) gind to the enhancer element of sea urchin arylsulfatase gene." Developmental Biology. 181. 284-295 (1997)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Akasaka et al: "Oral-aboral ectoderm differntiation of the sea urchin embryos is disrupted in response to calcium ionophore." Development Growth and Differentiation. 39 (in press). (1997)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Wada et al: "Color and weight of pearls produced by grafting the mantle tissue from a selected population for white shell color of the Japanese pearl oyster" Aquaculture. 142. 25-32 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書

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公開日: 1996-04-01   更新日: 2016-04-21  

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