| 研究概要 |
本研究では,葉緑体の機能を改変し育種的に利用するための,基礎的な知見を得るために,イネを材料として実験をおこなった.まず,イネのcDNAライブラリーを作成し葉緑体リボソームタンパク質遺伝子rpl19,rpl12-1,rpl12-2,rpl13,rpl15,rpl21,rpl24,rpl28,rpsl,rps9,rps17のcDNAクローンを単離し,塩基配列を決定しその構造を調べた.これらのcDNAをプローブとしてRFLPマッピングをおこない,rpl9,rpl12-1,rpl12-2,rpl13,rpl24,rpl21,rps9について染色体上の座位を決定した.その結果,これらの遺伝子が,イネの核ゲノム上でクラスターを構成することなく,散在していることが明らかとなった.
rpl12-1,rpl12-2,rpl13,rpl24について,イネの発芽初期における発現を,ノーザンハイブリダイゼーションを用いて解析した.その結果葉においては,発芽初期(吸水後4日目)は,mRNA量の蓄積が認められず,その後給水後10日目まで転写産物量が増加した.葉緑体ゲノムにコードされたリボソームタンパク質遺伝子についても,同様の発現パターンが認められた.根においては,これらの遺伝子はほとんど発現していないことがわかった.
さらに,rpl13およびrpl24についてはゲノミッククローンを単離し,転写開始点を決定した.その結果,これらの遺伝子は複数の箇所から転写が始まっていることがわかった.さらに,これら複数の転写開始点は,器官特異的に使い分けられている可能性が示された.
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