| 研究概要 |
我々はこれまでに、PP2Cには6種類のアイソフォーム(α,β-1,β-2,β-3,β-4,およびβ-5)が存在することを明らかにしてきた。これらのうちαとβは異なった遺伝子産物であり、βの5種類のアイソフォームは単一のpre-mRNAからの選択的スプライシングの産物である。また、これまでの研究の結果、マウス精巣の第1減数分裂パテキン期の精母細胞において、PPC2Cβ-3,-4および-5の発現が著しく上昇することが明らかになった。そこで、今回、精母細胞におけるPPC2Cβ遺伝子の発現制御機構の解明を目的に、PPC2CβゲノムDNAのクローニングと解析を行った。
PPC2CβゲノムDNAのクローニングにより、これまでに8個のエクソンの存在が明らかになった。エクソンIVからエクソンVIIまでにPPC2Cβの5つのアイソフォーム(β-1〜β-5)に共通の翻訳領域がコードされていて、エクソンVIIIにPPC2Cβ-1に固有の配列と終止コドンが観察された。PPC2Cβ-2〜-5のC端末をコードするエクソンはさらに下流に存在するものと考えられる。エクソンIIの上流にはTATAボックスが存在し、性決定に重要な役割を果たす転写因子であるSRYの結合配列、およびNRE(c-mosの精巣以外での転写を阻害する因子)の結合配列が見出された。エクソンIIとその上流より成る7kbpのDNA断片をルシフェレースのレポーター遺伝子の上流に導入し、p19細胞にトランスフェクトしたところ、プロモーター活性が検出された。すでに我々は、PT-PCRによる解析で、エクソンII/III/IVを含む転写産物がマウス成獣の精巣に特異的に発現することを明らかにしている。以上の結果から、今回見出したプロモーター(P2)がPP2Cの精巣における特異的発現を制御するプロモーターであると結論された。
|
