| 研究課題/領域番号 |
08670838
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
循環器内科学
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| 研究機関 | 福岡大学 |
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研究代表者 |
笹栗 学 福岡大学, 医学部, 講師 (00178675)
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| 研究分担者 |
野田 慶太 福岡大学, 医学部, 講師 (70289536)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1997年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1996年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | カリクレイン / キニン / アンジオテンシン / キニン・テンシン系酵素 |
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| 研究概要 |
最近確認されたACE阻害薬の心臓保護作用の機序のひとつとして局所キニン分解阻害作用が挙げられる。しかしながら、心臓におけるキニン産生系に関しては、酵素学的な同定はされてなかった。今回、我々は犬心筋から組織カリクレイン様酵素の精製を行い、この酵素が分子量約6万5千の糖蛋白で,キニン産生のみならずアンジオテンシン(Ang)IをAngIIに変換する活性を有することを明らかにした。我々は以前、降圧系酵素である組織カリクレインがキニン産生のみならず、AngIをAngIIに変換するという事実を明らかにし、キニン・テンシン系と命名した。この酵素もこの系に属することを確認した。精製酵素にて新たに作成した抗体を用いてWestern blotを行い、心臓内や他臓器の存在を検討した。その結果、犬心臓内では両心房、両心室、冠動脈に、他臓器では胸部大動脈、腎臓、膵臓、小腸、骨格筋にその存在を認めた。しかも、犬腎臓の遠位尿細管細胞由来のMDCK細胞にも同様のバンドを認めた。更に、胸部大動脈と腎臓からこの酵素の精製を行った結果、心臓由来の酵素と同様の活性と特徴を有していた。今回精製したカリクレイン様酵素(65KDa)は分子量が既知の犬膵臓カリクレイン(38KDa)や犬尿カリクレイン(40.5KDa)と差異を認めた。N末端部分アミノ酸配列の決定をしようと数回試みたが、N末端がブロックされていた。アミノ酸組成分析では既知のカリクレインとは異なっていた。以上のことから、この新規の酵素は心臓のみならず、血管や腎臓などに存在しキニン産生やAngII産生に関与することが明らかになった。今後抗体を用いたクローニングを行い、病態生化学的意義を明らかにしていきたい。
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