| 研究概要 |
骨髄異形成症候群から白血病化する過程における造血細胞の細胞増殖分化機構の破綻の機序をlate G1期を中心とした細胞周期調節の観点から明らかにすることを目的として、骨髄異形成症候群由来のSKM-1細胞を用い、GM-CSFとTGF-β1とのサイトカイン相互作用をG1期細胞周期制御の観点から分子レベルで解析した。
【方法】SKM-1細胞をGM-CSFおよびTGF-β1の存在下、非存在下で培養し、3H-thymidineの取り込みを測定し、細胞増殖を検討すると共に、Propidium iodide(PI)によりflow cytometoryで細胞周期の解析を行った。次に各種条件下で培養したSKM-1細胞からRNAを抽出し、細胞周期関連遺伝子の発現をRT-PCR法で検討した。【結果】SKM-1細胞はTGF-β1の添加により濃度依存性に細胞増殖が抑制されてG1 arrestをきたした。RT-PCRの結果、このG1 arrestに一致してcyclin D2,cdk 4,6の発現抑制が認められたが、cyclin D1,D3,cdk 2の発現には変化がみられなかった。一方、GM-CSF存在下ではTGF-β1のSKM-1に対する細胞増殖抑制作用および細胞周期停止作用は観察されず、TGF-β1の単独存在下で発現抑制のみられたcyclin D2,cdk 6遺伝子の発現が回復した。しかし、TGF-β1によるcdk 4遺伝子の発現抑制はGM-CSF存在下でも継続して観察された。【考案】骨髄異形成症候群由来のSKM-1細胞において、cyclin D2,cdk 6遺伝子を介する相互作用を通して、GM-CSFはTGF-β1によるG1期停止作用を解除するものと考えられた。cyclin D2,cdk 6遺伝子を介する細胞周期活性化機構の存在は今まで知られておらず、このpathwayが骨髄異形成症候群の白血化に関与する可能性が有るものと考えられた。
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