| 研究課題/領域番号 |
08670965
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
皮膚科学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
鈴木 茂彦 京都大学, 医学研究科, 助教授 (30187728)
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| 研究分担者 |
立花 隆夫 京都大学, 医学研究科, 助手 (40179718)
戸田 憲一 京都大学, 医学研究科, 講師 (80159045)
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| 研究期間 (年度) |
1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1996年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | アミロイド蛋白 / 皮膚アミロイド症 / 人工真皮 / 器官培養 / 表皮細胞 |
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| 研究概要 |
1 剥離表皮の培養の設定
人工真皮上での成人ヒト剥離表皮器官培養を出来るだけ長期にわたって確立するために次の方法によって培養を試みた。剥離表皮は外科的切除皮膚の一部をデスパーゼで処理することによって得た。1)人工真皮上に剥離表皮を重層し、全体を培養液中に浸した。2)人工真皮上に剥離表皮を重層し、人工真皮のみを培養液中に浸した。3)人工真皮上に剥離表皮を重層し、全体をメッシュに乗せてそれを培養液表面に接触させた。4日間の培養の後、凍結切片を作成して組織学的、免疫組織学的に検討した結果、1)では全例で表皮細胞は全層で核は好酸化し、細胞は局融解をおこして死滅していた。基底層のα6インテグリンは消失していた。2)では4例中2例で上記の変化が見られ、2例では基底層に所々でα6インテグリンの発現が見られ、基底細胞の部分的な生着がうかがわれた。3)では行った3例の全例で基底層でのα6インテグリンの発現が確認されたが部分的に消失していた。
2 皮膚アミロイド症患者表皮の培養とアミロイド物質の検出
苔癬型皮膚アミロイド症患者4例の皮膚をデスパーゼ処理により表皮真皮を分離し表皮を上記3)の方法によって器官培養し4日目に免疫組織化学的に検討した。多くの部分でα6インテグリンは発現していたが4型コラーゲンの発現は少なかった。明らかなアミロイドpコンポーネント陽性の物質は確認できなかったが、電顕的に観察した結果、径約8ナノメートルの直線状の線維が少数基底細胞の下部に確認され、アミロイド物質の産生がある可能性が示唆された。
3 考案
皮膚アミロイド症の患者の多くは中高年であり、病変部よりの表皮の長期間の器官培養は容易でない。今後は、ある程度大きい皮膚からの単離有棘細胞の培養を試みる必要があると思われた。
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