| 研究課題/領域番号 |
08670982
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
皮膚科学
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| 研究機関 | 杏林大学 |
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研究代表者 |
早川 和人 杏林大学, 医学部, 講師 (50146669)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1997年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1996年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | アトピー性皮膚炎 / 動物モデル / 経口トレランス / サイトカイン / mRNA / RT-PCR法 / in situ ハイブリダイゼーション / in situハイブリダイゼーション |
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| 研究概要 |
BALB/cマウスをTNCBにて感作した後、同一部位にTNCB外用をくり返した。同部位より経時的に生検をおこない、表皮、真皮より各々RNAを抽出した後RT-PCR法を用いて増幅し、各種サイトカインの産生を定量的に検討した。結果は急性期の表皮におけるIL-1、TNF-αのmRNA発現はTNCB刺激数時間から10時間で高値を示し、以後漸減し、IL-10mRNAの発現の上昇を認めた。慢性期においてはIL-10mRNAの発現がTNCB刺激直後から認められた。真皮においては急性期にはIL-2、IFN-γのmRNA発現がTNCB刺激数時間から10時間で著明に増加した。慢性期にはIL-4、IL-10のmRNA発現がTNCB刺激数時間で著明に上昇した。なおNiの皮内注射により感作したマウスを用いてNiのくり返し塗布をおこなったところ、TNCB外用時とほぼ同じ傾向が観察された。次いで抗原によるくり返しの刺激の前にNiを経口投与したところ、皮膚炎の出現は明らかに抑制された。また刺激部の生検を経時的におこない、表皮、真皮より各々RNAを抽出し、RT-PCR法を用いて各種サイトカインの産生を検討したところ、表皮におけるIL-1、TNF-αのmRNA発現は上昇を示さなかった。また真皮ではIL-2、IFN-γのmRNA発現は低値であり、IL-4、IL-10のmRNA発現の上昇が認められた。次いで、BALB/cマウスをTNCBで感作した後、同一部位にTNCB外用をくり返し、同部位より経時的に生検し、in situハイブリダイゼーションを用いてIFN-γ、IL-10のmRNAの発現の局在、時期について検討した。結果は、急性期の皮膚においては数時間から10数時間をピークとして真皮のT細胞にIFN-γmRNAの発現が認められた。この発現は次第に減弱し、それに反比例して真皮に浸潤するT細胞にIL-10mRNAの発現が増強した。慢性期の皮膚においてはTNCB外用3時間後から表皮内および真皮に浸潤するT細胞にIL-10mRNAの発現が認められ、24時間後まで続いた。IFN-γmRNAの発現は数時間後からごく軽度に認められるのみであった。
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