| 研究課題/領域番号 |
08671255
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
血液内科学
|
|---|
| 研究機関 | 埼玉医科大学 |
|---|
研究代表者 |
森 茂久 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (10190993)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
|
| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1997年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1996年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
|
|---|
| キーワード | 造血幹細胞 / 細胞表面分子 / CD34 / homotypic aggregation |
|---|
| 研究概要 |
本研究ではまず造血幹細胞、特にCD34陽性細胞のhomotypic aggregationに関与する細胞表面分子群を発現クローニング法を用いて検索し、その中から増殖に関与する分子を同定し、さらその分子の機能を増殖、分化、またシグナル伝達等の観点から解析を行うことを目的とする。新規の細胞表面分子の検索は、造血幹細胞の増殖、分化機構の解明に役立ち、さらに造血器腫瘍、ことに白血病細胞起源の詳細な診断、遺伝子治療などの治療への応用につながると考える。
まずCD34陽性の白血病細胞株(KG-1など)や造血器腫瘍患者骨髄血のCD34陽性細胞よりmRNAを抽出し、オリゴdT及びランダムプライマーを用いてcDNAに逆転写した。これらを有核細胞発現プラスミドに組み込み、発現ライブラリーを作成した。これら発現ライブラリーを電気穿孔法を用いてCOS-7細胞に遺伝子導入を行い、CD34陽性細胞と反応する細胞群をパニング法の変法により濃縮した。この系を用いてKG-1の発現ライブラリーからCD34陽性細胞に結合する分子をコードするcDNAを2個単離した。このcDNAの塩基配列を決定し、既知の遺伝子と比較検討した。その結果このcDNAはCD54(ICAM-1:intercellular adhesion molecule 1)遺伝子の一部と同一で、新規の遺伝子ではなかった。
今後も引き続き残りのcDNAの解析を行なう予定である。また他の細胞の発現ライブラリーから、この系を用いてCD34陽性細胞に結合する分子をコードするcDNAを単離することも計画している。
|
