| 研究課題/領域番号 |
08671327
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
外科学一般
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
佐藤 成 (1997) 東北大学, 医学部, 助手 (20250764)
佐竹 正博 (1996) 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (70147370)
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| 研究分担者 |
藤盛 啓成 東北大学, 医学部, 助手 (50238622)
土井 秀之 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (90188839)
大類 洋 東北大学, 医学部, 教授 (20100050)
佐藤 成 東北大学, 医学部, 助手 (20250764)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1997年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1996年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | 自然抗体 / 異種移植 / αガラクトース |
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| 研究概要 |
ブタからヒトへの異種移植における超急性拒絶反応はヒト自然抗体がブタ血管内皮表面に存在するGalα1,3Gal(αGal)糖鎖を標的に攻撃することによりおこる。この超急性拒絶反応を抑制する方法の一つにαGal糖鎖を静注しヒト自然抗体を中和することがある。我々はガラクトースなどの二基質より化学的にαGal糖鎖を合成しELISAによりこの糖鎖のヒト抗αGal抗体中和作用を確認したが、この方法では手間がかかり、成人の末梢血中の全抗体を中和するには1000万円以上を要することがわかった。そこで加水分解酵素であるα-ガラクトシターゼを用いた合成法により上述の方法よりもかなり安価に、効率良く目的二糖鎖を合成することができた。この際の合成物であるニトロ基の結合した二糖類は、αGal糖鎖とほぼ同様のヒト抗αGal抗体中和作用を持つことも確認できた。
中和法のみで全抗体を不活性化することはコストの面でやや非現実的なため、カラムによる抗体の吸着を併用することを試みた。我々はαGalを側鎖糖端末として持つブタサイログロブリンを用いたカラムを作成し抗αGal抗体除去能を確かめたが、より選択的に抗αGal抗体を除去するため、上述の合成糖鎖をリガンドさせたカラムを製作を試みている。一方、ブタサイログロブリンをカップルしたビーズにより、ヒトリンパ球のうちにαGalに対する表面イムノグロブリンを持つB細胞を選択的に採取する方法を確立し、この方法を用いてこの細胞群の特徴づけ、および末梢血、脾、腸間膜リンパ節、扁桃腺における局在を調べた。またこのB細胞を、自己PHAsupやmitogenで活性化し、異種反応性自然抗体を産出する培養系の確立を試みている。
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