| 研究概要 |
【目的】ラット異所性心移植モデルにおいて,移植時ドナー細胞の選択的移入により,allograftの生着延長効果,免疫寛容が得られるか否かを検討した.
【方法】
1.ドナー細胞の分離(magnetic beads法):ドナーの脾細胞を摘出し、メッシュにて粉砕。Ficoll法にて比重遠心を行い、リンパ球層を得た。各種モノクローナル抗体を4℃、60分反応させた。用いた抗体はOX-8(抗CD8),OX-38(抗CD4),OX-33(抗B),G4・18(抗CD3)である。anti-mouse IgGをコートしたbeads(Dynabeads M-450)を37℃、30分反応させた。反応後目的細胞をnegative selection、あるいはpositive selectionにて回収し、flow cytometryでpurityを確認した。2.異所性心移植:250-300gのBN(RTln)をドナーに、Lewis(RTal)をレシピエントとし、Ono&Lindseyの方法にて腹部に異所性心移植を行った。3.実験群:移入脾細胞数、免疫抑制法により、以下の8群を作成した。(1)コントロール群;(2)FK 506 0.5mg/kg day-l,0,1im群;(3)脾細胞 2x10^7+FK 506群;(4)CD4^+細胞2x10^77+FK 506群;(5)CD8^+細胞2x10^7+FK 506群;(6)B細胞2x10^7+FK 506群;(7)FK 506 1.0mg/kg day0,1,2群;(8)B細胞5x10^7+FK506 1.0mg/kg群
【結果】各群におけるgraftの平均生着期間は6.8±0.4日(n=5),13.7±2.8日(n=7),15.7±5.3日(n=7),10.0±1.5日(n=7),10.4±1.6日(n=7),19.5±4.4日(n=6),6.8±0.4日(n=5),33.0±3.7日(n=3),48.3±14.0日(n=4)であった。また最長生着期間は(8)群では38日,(7)群では70日であった.
【結論】1.ラット異所性心移植モデルにおいて,B細胞の移植時同時移入および短期間の免疫抑制剤投与により,著明なallograft生着延長効果が得られた.
2.しかし免疫寛容の獲得には至らず,移入細胞数,併用免疫抑制法のさらなる検討が必要と考えられた.
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