ブタ急性肝壊死モデルに対する肝細胞スフェロイド移植の実験的研究

• 研究課題/領域番号: 08671415
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 帝京大学 (1997); 東京大学 (1996)
• 研究代表者: 長島 郁雄 帝京大学, 医学部, 講師 (90202423)
• 研究分担者: 成瀬 勝俊 東京大学, 医学部, 助手 ; 長田 卓也 東京大学, 医学部, 助手 (90272559) ; 酒井 康行 東京大学, 生産技術研究所, 助手
• 研究期間 (年度): 1996 – 1997
• 研究課題ステータス: 完了 (1997年度)
• 配分額: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円); 1997年度: 300千円 (直接経費: 300千円); 1996年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
• キーワード: 肝細胞移植 / 肝細胞スフェロイド / 急性肝不全 / 大動物実験

研究概要

1)ブタ肝細胞スフェロイドの調整
方法論は既に確立しており、分離精製した遊離肝細胞を24時間浮遊旋回培養することによって,5X10^6個/mlの肝細胞スフェロイド懸濁液100mlを門脈内注入用として調整した。
2)ブタ急性肝壊死モデルの作成
腸骨動脈-肝動脈バイパスを作成、この回路を加温し、肝を選択的に44〜45'Cで1時間温熱潅流することにより、広範な急性肝壊死モデルを作成した(このブタが48時間以内に全例死亡することは確認済み)。
3)急性肝壊死ブタへの肝細胞スフェロイド懸濁液の注入
肝潅流終了後24時間目に門脈内に挿入したチューブより、ゆっくりとone shot注入したが、有意な生存率の向上も、肝機能面の代用も示しえなかった。病理組織学的所見としては、注入された肝細胞スフェロイドの一部は類洞内に、一部はグリソン内にその集積を認めるが、それら細胞の大部分は壊死に陥っていた。
4)まとめ
本実験は、急性肝壊死を来した大動物の肝内に、肝細胞重合体(スフェロイド)を経門脈的に注入移植することに意義があると考えられたが、その結果は芳しいものではなかった。その原因を分析するに、
1)細胞スフェロイド粒子の大きさが一様でなく、あるものはグリソン門脈枝を塞栓し、血流を途絶する方向に働いた可能性。
2)類洞にとどまったスフェロイド粒子も高率に壊死に陥っており、生着する以前に類洞内の循環障害を惹起した可能性。
などが推測された。