| 研究分担者 |
渋谷 潔 千葉大学, 医学部・付属病院, 助手
野本 靖史 千葉大学, 医学部・付属病院, 助手 (20218374)
飯笹 俊彦 千葉大学, 医学部, 助手 (10272303)
斉藤 幸雄 (斎藤 幸雄) 千葉大学, 医学部・付属病院, 助手 (60261905)
藤澤 武彦 千葉大学, 医学部, 教授 (80110328)
山口 豊 千葉大学, 医学部, 教授 (80009448)
光永 伸一郎 千葉大学, 医学部・附属病院, 助手 (50272331)
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| 研究概要 |
本研究の前段階での研究にて,細胞外基質をコーティングしたポリスチレンディッシュ上で無血清培地を用いたヒト気管支片の組織培養を行い,NHBEC(正常ヒト気管支上皮細胞)のoutgrowthの面積を測定して細胞外基質の効果を比較検討した結果,(1)TypeIVコラーゲンのコーティングが他のtypeに比較して安定したNHBECの増生を促すこと,(2)TypeIVコラーゲンのコーティングにラミニン,フィブロネクチンの細胞接着蛋白質を加えることでNHBECの増生は更に促進されることを確認している。今回は臨床応用を目指した新しい人工気管を開発する目的で,in vitroおよびin vivoにて,これらの細胞外器質コーティングの効果を人工気管の素材として用いられるMarlex mesh上におけるNHBECの増生に対する促進の有無で検討した。
(1)Marlex mesh上でのNHBECのexplant cultureの検討では,TypeIコラーゲンを厚くコーティングした上にTypeIVコラーゲンおよびラミニン,フィブロネクチンの細胞接着蛋白質をコーティングすることでNHBECの増生は,TypeIコラーゲン単独のみに比して促進された。
(2)ヒト気管支片を縫着したporous typeのmesh型人工気管をNude rat皮下へ移植しヒト気管支上皮細胞のin vivoでの増生を検討した結果,(1)移植8週後,緻密な結合組織がMarlex mesh のpore内へ侵入しており,組織親和性が充分なことが判明した。(2)In virtoで認められたtypeIコラーゲンに加えるtypeIVコラーゲンおよびラミニン,フィブロネクチンのコーティングがtypeIコラーゲン単独のコーティングに比較してNHBECの増生を有意に促進する効果は明らかではなかったが,Mesh型人工気管内腔面においても気管支組織片からのヒト気管支上皮細胞の増生が確認された。(66.6%)。
以上,Marlex meshで作製した人工気管をNude rat皮下へ移植した場合,接触した気管上皮から速やかなNHBECの増生がみられ人工気管内腔を被覆することが確認され,人工気管の実用化の可能性が示唆された。
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