| 研究課題/領域番号 |
08671652
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
整形外科学
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| 研究機関 | 三重大学 |
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研究代表者 |
須藤 啓広 (1997-1998) 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (60196904)
塩川 靖夫 (1996) 三重大学, 医学部, 助教授 (80115708)
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| 研究分担者 |
笠井 裕一 三重大学, 医学部・附属病院, 助手 (20242943)
須藤 啓広 三重大学, 医学部・附属病院, 講師 (60196904)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1998年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1997年度: 200千円 (直接経費: 200千円)
1996年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | 破骨細胞 / 単球 / Fusion Regulatory Protein (FRP)-1 / CD98 / モノクローナル抗体 / c-src / Fusion Regulatory Protein(FRP)-1 / C-Src / 破骨能 / カルシトニンレセプター / アクチンリング / ビリジノリン / FRP-1 / 多核巨細胞 / CT recepter / TRAP |
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| 研究概要 |
細胞融合制御因子として見い出されたFusion Regulatory Protein(FRP)-1/CD98分子は、血液細胞のなかでは単球に選択的に発現しており、また単球に抗FRP-1抗体を作用させると、何らのFusogenなしに多核巨細胞が出現することが明らかになった。我々はこの多核巨細胞が破骨細胞としての性質を持つことを証明してきたが、破骨細胞形成に関与する遺伝子について解析した。reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR)法、RNase protection assay(RPA)法を用いて解析したところ、protooncogeneであるc-srcが抗体を作用させて約3時間で発現が認められた。さらに、抗体を作用させることによりcathepsin-K、CAII、V-ATPase、VNR、TRAP、OPN、c-fmsは、発現量の増加が認められたが、逆に、galectin-3では低下し、c-fosでは変化がなかった。特に、cathepsin-K、CAIIなど骨吸収に強く関与していると考えられている遺伝子にその発現量の増加が顕著であった。また、二重免疫染色を用いてFRP-1/CD98とp60c-srcのdistributionを調べたところ、破骨細胞への分化に伴い、両者がco-localizeしてくることがわかった。
次に、fusion regulatory protein(FRP)/CD98に対するモノクローナル抗体の解析を行ったところ、細胞融合を阻害する抗体(HBJ127)が存在することが明らかとなった。抗FRP-1抗体とHBJ127はepitopeの違うことがわかり、抗FRP-1抗体を末梢血単球に作用させたあと、HBJ127を作用させるとc-srcの発現が抑えられることが明らかとなった。
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