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アクティベーション・タギングを用いたアブシジン酸についてのシグナル伝達系の解析

研究課題

研究課題/領域番号 08760113
研究種目

奨励研究(A)

配分区分補助金
研究分野 生物生産化学・応用有機化学
研究機関東京大学

研究代表者

鈴木 義人  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (90222067)

研究期間 (年度) 1996
研究課題ステータス 完了 (1996年度)
配分額 *注記
900千円 (直接経費: 900千円)
1996年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワードアブシジン酸 / アクティベーションタギング / タバコ / シグナル伝達系
研究概要

本研究は、activation taggingによりアブシジン酸(ABA)のシグナル伝達系の解析を行うことを目的としている。対象としたABAの作用はタバコのプロトプラストの分裂阻害能であり、ABAによる阻害を受けずに分裂する変異株の選抜を目指した。以下、得られた成果を示す。
1.タバコ葉肉細胞のプロトプラストを、調製後一週間目から段階的な濃度のABA存在下で培養したところ、0.3μMから生長阻害が認められ、30μMでほぼ完全に分裂が抑えられた。ABAを与える時期を遅らせると阻害効果が低下することが判明した。得られた結果より、ABA耐性変異株選抜用のABA濃度を100μMに決定した。
2.調製後四日目のプロトプラスト(約40,000,000個)を、activation tagging用ヴェクター(pPCVICEn4HPT)を持つアグロバクテリウムと共存培養することにより形質転換後、ABAによる選抜を行った。アガロースに包埋後、約10日でABAを入れないコントロール区では無数のカルスが形成されたのに対し、ABA存在下で2クローンのABA耐性カルスが得られた。
得られたカルスは、再分化が容易ではなく、最近になってようやく再分化体が得られつつある。十分な量の葉が得られるのを待ってプロトプラストのABA耐性能の確認を行い、またT-DNA近傍の遺伝子の回収などを行っていく予定である。

報告書

(1件)
  • 1996 実績報告書

URL: 

公開日: 1996-04-01   更新日: 2016-04-21  

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