腎癌内の微少発現遺伝子検出法の開発-In Situ RT-PCR法とCGH法の応用-

研究課題

研究課題/領域番号	08771290
研究種目	奨励研究(A)
配分区分	補助金
研究分野	泌尿器科学
研究機関	東京女子医科大学
研究代表者	奥田比佐志東京女子医科大学, 医学部, 助手 (80246545)
研究期間 (年度)	1996
研究課題ステータス	完了 (1996年度)
配分額 *注記	1,000千円 (直接経費: 1,000千円) 1996年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワード	腎癌 / RT-PCR / 微少遺伝子
研究概要	◆腎細胞癌手術摘出標本でのin situ PCR法 (1)正常組織のin situ PCR法正常組織でのβ-actin、cadherin、c-myc、PyNPaseの発現の確認(ノーザン法、10例全例確認) (2)確認した組織でRT-PCR法を行う。(10検体 β-actin、cadherin、c-myc、PyNPaseを使用した。)→β-actin、cadherin、PyNPaseは全例に発現を認めた。c-mycは3例に確認され、残り7例には確認されず。 (3)腎癌組織でβ-actin、cadherin、PyNPase等のmRNAの発現を確認した。 (ノーザン法、15検体)→15検体全例に発現を認めた。 (4)腎癌組織を用いてin situ RT-PCR法(15検体、β-actin、cadherin、c-myc、PyNPase)→β-actin、cadherinは全例に確認された。c-mycは5例に発現を認めた。PyNPaseは4例に発現を認めた。 ◆CGH(comparative genomic hybridyzation)法を用いて染色体上の遺伝子の位置関係の検索。 (1)3番染色体における異常の検出:腫瘍組織の遺伝子DNAをCGH手法を用いて検索した。→3番染色体のコピー数に検体ごとに大きな差があった。(約70%の減弱)その責任遺伝子座を今後探索していく予定である。