ヒルシュスプルング病における遺伝子異常の解析

• 研究課題/領域番号: 08771551
• 研究種目: 奨励研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 小児外科
• 研究機関: 杏林大学
• 研究代表者: 関 信夫 杏林大学, 医学部, 助手 (20281339)
• 研究期間 (年度): 1996
• 研究課題ステータス: 完了 (1996年度)
• 配分額: 400千円 (直接経費: 400千円); 1996年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
• キーワード: ヒルシュスプルング病 / 遺伝子異常

研究概要

この研究の目的はヒルシュスプルング病における遺伝子レベルの異常を検索することである。その実験としては(1)ウィスター系ラット(将来的にはaganglionosisラットを用いる予定)の肝および末梢血液
(2)家族歴を示さないヒト・ヒルシュスプルング病の症例の末梢血液
(3)正常ヒト末梢血液
からPK-フェノール法でゲノムDNAを抽出した。こののち、エンドセリンレセプターB(EDNRB)遺伝子の7エクソンに対してそれぞれイントロン内でプライマーを作成してPCRにて増幅し、至適温度でSSCP(single strand conformation polymorphisms)を行いバンドの検出を試みた。さらに、シークエンスを行い変異部位の検索を行った。結果として、欠失や点突然変異などの異常はみられなかった。
現在は神経提由来の組織の発生、分化に大きな役割を果たすと報告されているRET癌遺伝子(RET proto oncogene)について検討している。RET癌遺伝子の20のエクソンについて各エクソン毎に作成したプライマーを用いてPCRにて増幅し、ENDRB遺伝子と同様にSSCPおよびシーケンスを行い変異部位を検索していく予定である。