| 研究課題/領域番号 |
08835022
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
咀嚼
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| 研究機関 | 神奈川歯科大学 |
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研究代表者 |
川瀬 俊夫 神奈川歯科大学, 歯学部, 教授 (30084784)
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| 研究分担者 |
野崎 直仁 神奈川歯科大学, 歯学部, 助手 (70222198)
西山 勝弘 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (20084783)
斉藤 滋 神奈川歯科大学, 歯学部, 教授 (80084713)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
1997年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1996年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | 咀嚼システム / 歯周組織 / 機械的外力 / HPLF / HABC / 細胞接着因子 / 細胞外基質 / オステオネクチン / ヒト歯根膜線維芽細胞 / 歯根膜由来線維芽細胞(HPLF) / 歯槽骨由来骨芽細胞(HABC) / Flexcer Strain Unit |
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| 研究概要 |
歯科領域で最も重要な研究課題の一つに、咀嚼システムを生物学的見地から明らかにする必要がある。咀嚼時に間欠的な機械的外力が歯周組織に負荷され、細胞に如何なる細胞生物学的な効果をもたらすかを検索することを目的としている。
ヒト歯根膜由来線維芽細胞(HPLF)と歯槽骨由来骨芽細胞(HABC)type1 collagenをコーティングしたflexibl wellに播種し、confuluentになるまで培養した。Flexer strain unitを用いて負荷を最大伸張度を6〜24%、3cycles/minの頻度で24時間の培養を行った。負荷時に、^<35>S-Metを添加し分泌タンパク質をSDS-PAGEで分離し、オートラジオグラフで解析した。また、培養上清中のCASF(cell attachment and spreading factor)活性の特徴さらに、オステオネクチンをイオン交換クロマトグラフィーで分画しSDS-PAGEとWestem blotting法で解析した。
その結果 1)細胞増殖において、HPLFは殆ど影響がないが、HABCは20〜30%の増加が認められた。
2)細胞の分化はALPaseを指標として検索すると、HPLFとHABC共に伸張強度に従って、ALPase活性は上昇した。特徴的なことは24%の強度でHPLFのALPaseがHABCのALPase活性と同程度になった事である。
3)3種の伸張強度におけるCASF活性の変化は、必ずしも伸張強度に依存せずHPLFとHABC共に18%の伸張強度で最大値を示した。
4)^<35>S-Met標識の細胞外タンパク質は、特徴的なタンパク質は示唆されたが、イオン交換クロマトグラフィーの塩濃度に依存した溶出パターンからposttranslational modification(糖添加、リン酸化)の調整に機械的外力画家変わっていることが示唆された。
5)CASFsは疎水性の基材に疎水結合し、未同定であるが細胞に対する結合ドメインを介して細胞と結合する。
6)HPLFに対するCASFsはI型コラーゲン、フィブロネクチンに加えて、Western blotting法でオステオネクチンが同定できた。
従って、機械的外力は歯周組織の恒常性を調節する因子として作用する事が明らかになった。
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