| 研究課題/領域番号 |
08839005
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
免疫の制御機構
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
瀧 伸介 東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (50262027)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
1998年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1997年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1996年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | 免疫グロブリン / 遺伝子組み換え / 対立導伝子排除 / B細胞分化 / インターロイキン7 / トランスジェニックマウス / ジーンターゲティング / V(D)J組み換え / シグナル配列 / レパートリー選択 / VCDP組み換え / インターロイキンク / インターロイキンク受容体 / 対立遺伝子排除 |
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| 研究概要 |
免疫グロブリン重鎖(IgH)遺伝子のV(D)J組み換えの調節を理解するために、IgV遺伝子をJH遺伝子座に挿入した変異をヘテロに持つマウス(T15i/+マウス)を用いて、以下のことを明らかにした。1)T15i/+マウスを生田らによって樹立されたIL-7受容体を欠損するマウスと掛け合わせて得られたT15i/+IL-7R^<-/->マウスでは、対照マウスにおいてはVHT15陽性B細胞の末梢での比率が約40%程度であるのに対して、80%以上であり、pro-B細胞のIgH組み換え時の生存がIL-7によって調整されており、IL-7シグナルの非存在下ではPro-B細胞は3度の遺伝子組み換え、すなわちD_H→V_HT15、および野生型IgH遺伝子座における通常のVDJ組み換え、を行うのに十分なだけ長く生存できないのではないかと考えられる。2)T15/i IL-7R^<-/->マウスに、さらにκ鎖をトランスジーンとして導入したマウス(T15i/+κtg^+IL-7R^<-/->)でも、V_HT15陽性細胞が末梢B細胞のほとんどを占めるという現象は、野生型(T15i/+IL-7R^<+/+>)マウスで見られるようなV_HT15陰性B細胞の優性に復帰しなかった。また、IL-7Rの欠損によってもたらされる末梢のB細胞数の減少も、野生型の数に復帰することはなかった。従って、IL-7のシグナルは、表面IgMを介するシグナルとは独立に働くものであることが分かった。3)さらに、T15i/+マウスではD_H→V_HT15組み換えが起き、挿入したV_HT15を破壊し、野生型IgH遺伝子座を発現するB細胞が出現するが、この二次組み換えが、挿入したV_HT15遺伝子の5'側にneomycin耐性(neo^r)遺伝子が残存していることに起因するのか否かを、FLIP-FRTシステムを用いてneomycin耐性遺伝子(FRTシグナル配列で挟まれている)を欠落させることによって検討した。このマウスでもneo^r遺伝子を欠落させていないT15i/+マウスと同様な比率で野生型IgHを発現するB細胞が出現した。従って、この2次組み換えは、V_HT15遺伝子自身の構造(配列もしくは転写活性)によるものであると考えられる。
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