| 研究課題/領域番号 |
08877028
|
|---|
| 研究種目 |
萌芽的研究
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
医化学一般
|
|---|
| 研究機関 | 埼玉医科大学 |
|---|
研究代表者 |
北村 邦男 埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (70049857)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1996
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
|
| 配分額 *注記 |
1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
1996年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
|
|---|
| キーワード | 神経疾患 / 傍腫瘍性症候群 / Phage-display / 自己抗体 |
|---|
| 研究概要 |
自己抗体検索の従来法である発現cDNAライブラリーを用いた方法にて自己抗体に対する抗原蛋白質を検索した。この目的のために縦隔腫瘍に伴う傍腫瘍性症候群患者自己抗体を使用することとし、ヒト脳λgt11 cDNAライブラリースクリーニングで同抗体に対する2つの陽性クローンを得た。この2つのクローンのDNA配列決定の結果、両者ともphosphacanとして知られている神経系のプロテオグリカンの一部をコードしていることが明らかとなった。このような従来法による検討結果を基に、次により簡便なスクリーニング法の開発に着手した。上記phosphacan cDNAが含まれていることが確認されたライブラリーの全インサートDNAを、Sfi I site又はNot I siteを含むようにデザインしたPCR primerでPCR増幅し、pCAN-TAB5に再組み込みすることによりphage displayライブラリーの作製を試みた。しかしながら、十分なタイタ-をもつ良好なライブラリーの作製には至らず、上記患者抗体を結合させたバイオセンサーチップ上にトラップされたクローンにはphosphacan cDNAは検出されなかった。現在、他のphage display vectorであるSurfZAP vectorへの組み込みを試みている。又、ヒト脳mRNAからphage display vectorに組み込み可能なcDNAライブラリーの構築も平行して行っている。
|
