研究課題/領域番号 |
08877230
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研究種目 |
萌芽的研究
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
整形外科学
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研究機関 | 名古屋大学 |
研究代表者 |
石黒 直樹 名古屋大学, 医学部, 講師 (20212871)
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研究分担者 |
伊藤 隆安 名古屋大学, 医学部, 医員
恵美 宣彦 名古屋大学, 医学部, 医員
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研究期間 (年度) |
1996
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研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1996年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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キーワード | gene transfection / NF-κB / AP-1 / glutathion peroxidase / Iiposome |
研究概要 |
カチオンリポソームを使用してベクターにGlutathion peroxidaseのDNAを組み込み、培養ヒト滑膜細胞、ヒト由来軟骨系細胞に対してヒトGlutathion peroxidaseのDNAを遺伝子導入し、発現させた細胞株を作成、選択倍地にて培養、発現細胞株のみを採取した。さらに遺伝子導入させたヒトGlutathion peroxidaseの発現はwestern blotと酵素活性で確認した。これら細胞にIL-1,TNF刺激下にNF-κBの二つの転写因子に注目してGel shift Assayを行いこれら転写因子の阻害が起こっていることを確認した。またAP-1 shiteまたはNF-κB siteの下流にある遺伝子(IL-8,MMP-1,MCP-1)注目してこれらのmRNA発現の抑制をNorthern Blotにより確認した。この事は転写因子の転写活性が抗酸化酵素の導入により阻害されたことを示し、目的の細胞を作り出した事を証明する。現在これらのデータを纏めて投稿すべく、論文作成中である。
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