| 研究課題/領域番号 |
08878125
|
|---|
| 研究種目 |
萌芽的研究
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
細胞生物学
|
|---|
| 研究機関 | 広島大学 |
|---|
研究代表者 |
濱田 勝友 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (00136144)
|
|---|
| 研究分担者 |
熊崎 努 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (20161698)
星 正治 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (50099090)
藤川 和男 近畿大学, 原子力研究所, 助教授 (90247958)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1996 – 1998
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
|
| 配分額 *注記 |
2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
1998年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1997年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1996年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
|
|---|
| キーワード | Transforming RNA / 形質転換 / 分泌蛋白 / Polypurine配列 / リボゾーム / シグナル認識粒子 / U5 RNA / transforming RNA / 放射線照射細胞 / polypurine sequence / in vitro transformation / ^<60>Co / human diploid cells / Alu配列 |
|---|
| 研究概要 |
TransformingRNAの発見
poly(A)tail付加RNA(GAUUUCCGUGGAGAGGAACAACUCUGAGU)はRNA polymerase II依存性発現により正常ラット繊維芽細胞を高頻度に形質転換する。活性はpolypurine GGAGAGGAA配列に依存した。形質転換細胞は継代により二次的形態変化,足場非依存性及び腫瘤形成能を獲得した。またこのRNAはin vivoで細胞外基質蛋白fibronectin合成を翻訳レベルで抑制した。RNA pol II-dependentnon-coding transcriptがtransforming agentになることが明らかとなった。
TransformingRNA(TR)の分泌蛋白合成への関与
TRの蛋白合成に与える影響をin vitro reticulocyte lysate systemで検討した。分泌蛋白としてpreβ-lactamase,非分泌蛋白としてluciferaseをモデルとして用いた。TRはpSP64(polyA)に挿入したcDNAからSP6 RNA polymeraseを用いて作成した。上記両蛋白合成系にcap及びpoly(A)tail構造をもつTRを加えるとpreβ-lactamase合成の抑制が認められた。更にoligo(GGAGAGGAA)を用いて追試した。oligoによりpreβ-lactamase合成抑制が認められた。3S-9ntは分泌シグナルを有する蛋白合成の初期化に影響を与えないが伸長を阻害した。0ligoはリボゾーム内の28S rRNAとantisense oligo(TTCCTCTCC)はシグナル認識粒子(SRP)内の7SL RNAと相補的に結合できることから分泌蛋白合成における両RNAの生理的協調作用をGGAGAGGAAが障害していると考えられた。この成績を基にヒト細胞からTR候補転写物の検出を行い正常ヒト細胞の不死化能について検討を行っている。
|
