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レトロウイルスcDNA発現ライブラリーによる新規サイトカイン遺伝子の単離

研究課題

研究課題/領域番号 09250205
研究種目

重点領域研究

配分区分補助金
研究機関東京大学

研究代表者

北村 俊雄  東京大学, 医科学研究所, 客員助教授 (20282527)

研究分担者 谷 憲三朗  東京大学, 医科学研究所, 助教授 (00183864)
浅野 茂隆  東京大学, 医科学研究所, 教授 (50134614)
研究期間 (年度) 1997
研究課題ステータス 完了 (1997年度)
配分額 *注記
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1997年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
キーワード変異 / サイトカイン / サイトカインレセプター / レトロウイルス / 発現クローニング
研究概要

我々が以前に開発したレトロウイルスcDNAライブラリーを利用して、新規サイトカイン遺伝子のスクリーニングを行っている。ストラテジーとしては、まず突然変異原(EMS)で処理したマウスIL‐3依存性プロB細胞株Ba/F3から、各種ストローマ細胞と共培養を行うことによってストローマ細胞依存性の変位Ba/F3株を樹立する(Ba/F3細胞は通常ストローマ細胞依存性増殖は示さない)。この場合変異Ba/F3株は異所性のサイトカインレセプター発現によって、ストローマ細胞由来のサイトカインに対する反応性を獲得したことが考えられる。実際、樹立した変異Ba/F3株のうち多くは、GM‐CSF、SCFなど既知のサイトカインに対するレセプターを発現することによってストローマ依存性を獲得したことが、サイトカイン中和抗体を利用した実験で判明した。次に既知のサイトカイン抗体でそのストローマ依存性が抑制されない変異Ba/F3細胞株の増殖を維持するストローマ細胞のcDNAライブラリーをレトロウイルスベクターpMXを利用して作成した。このライブラリーを変異Ba/F3株の増殖を維持できないストローマ細胞に導入して変異Ba/F3株のストローマ依存性増殖を指標として、ライブラリーをスクリーニングした。得られたcDNAを現在解析中である。

報告書

(1件)
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (6件)

  • [文献書誌] Onishi,M.et al: "Cytokine receptors : Structures and signal transduction" Int.Rev.Immunol. (in press). (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Kitamura,T: "New experimental approaches using retrovirus‐mediated expression screening" Int.J.Kematol. (in press). (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Kawakami,Y.et al: "Braton'S tyrosine kinase(Btk)regulates the JNK/SAPK kinase activity" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. Vol.94. 3938-3942 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Ito,K.et al: "Development of a novel selective amptifier gene for controllable expansion of transduced kematopoietic cells" Blood. Vol.90. 3884-3892 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Hata,D.et al: "Invehement of Bruton'S tyrosine kinase in FeeRI‐dependent mast cell degranulation and cytokine production" J.Exp.Med. (in press). (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Morikawa,Y.et al: "Indaction of synaptosomal‐associated protein‐23kd(SNAP-23) by Various cytokines" Blood. (in press). (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

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公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

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