| 研究概要 |
ヒト末梢血、臍帯血よりnull細胞を分離し、CD34とIL-6Rに対するモノクローナル抗体で二重染色後、セルソーターを用いてCD34^+IL-6R^<+Or->分画を得た。これらの細胞を標的として、IL-6,IL-11,LIF,OSM,CNTF,CT-1などに共通なシグナル伝達分子であるgp130を介する造血シグナルの解明を行った。これまでの検討で、gp130を介するシグナル単独では幹細胞に対して有意な作用を示さないが、c-kitあるいはIL-3Rを介するシグナルを同時に活性化することにより、G-CSF,Epo,TPOなどの細胞系列特異的因子非依存性に3系統の成熟血球を誘導できることを見い出した。IL-3Rを介するシグナルは幹細胞の生存や初期の増殖に必須であり、一方、SCFはIL-3の存在下で幹細胞の増殖を促進した。gp130を介するシグナルは、主に成熟因子として作用した。このgp130のシグナルで誘導される赤血球、巨核球の成熟度に関して、GPAやCD41の発現レベルあるいは巨核球のploidyを指標として生理的成熟因子であるEpo,TPOと比較したところ、質的に明らかに劣っていた。現在、c-kit,IL-3R,gp130を介するシグナル間のクロストークについて詳細に検討するために、Jak-Stakシグナル伝達路やMAPキナーゼカスケードに存在するシグナル伝達分子に対するアンチセンスDNA分子(オリゴS)を合成し、キ-シグナルの検出を行っている。gp130を介するシグナルは、特に赤血球系幹細胞の増幅、増殖、分化に有用であることから、末梢血、臍帯血より得られたCD34^+IL-6R^<+or->細胞を標的細胞として幹細胞のex vivo増幅にも着手している。その結果、pg130を介するシグナルが、IL-3R,c-kit,fit3,c-Mplを介するシグナルと協調的に作用し、CFU-GM,BFU-E,CFU-Mix,CFU-Megを最高300倍程度まで増幅することも明らかにしている。今後は、自己再生能に重点を置いて骨髄ストローマ細胞との共培養系におけるLTC-ICを測定することにより、gp130を介するシグナル未分化幹細胞に対する作用についても検討を加えていく予定である。
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