抗腫瘍免疫におけるT細胞活性化の抑制

• 研究課題/領域番号: 09256202
• 研究種目: 特定領域研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 斉藤 隆 千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50205655)
• 研究分担者: 山崎 晶 千葉大学, 大学院・医学研究科, 助手 (40312946) ; 荒瀬 尚 千葉大学, 医学部, 助手 (10261900) ; 大野 博司 千葉大学, 医学部, 助教授 (50233226)
• 研究期間 (年度): 1997 – 1999
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 51,000千円 (直接経費: 51,000千円); 1999年度: 18,000千円 (直接経費: 18,000千円); 1998年度: 18,000千円 (直接経費: 18,000千円); 1997年度: 15,000千円 (直接経費: 15,000千円)
• キーワード: 抗腫瘍免疫 / T細胞 / ネガティブシグナル / CTLA-4 / リソソーム / Gab-2 / SHP-2 / チロシリン酸化 / シグナル伝達機構 / Jak3 / 抑制性シグナル / チロシンモチーフ / Co-stimulation / アダプター複合体 / μ2 / チロシンリン酸化 / internalization

研究概要

抗腫瘍免疫を賦活するために、抗腫瘍免疫を中心的に担うT細胞の活性化機構を明らかにすることを目的とし、その中でもとりわけ、T細胞の活性化をネガティブに抑制しているシグナル伝達機構を解明し、その人為的制御を目指した。そのために、1.昨年に引き続き、活性化をネガティブに抑制するCTLA-4分子のT細胞での発現調節とネガティブシグナルの誘導機構を解明する、2.SHP-2結合分子Gab-2のT細胞における役割を明らかにする、ための解析を進め、以下の点を明らかにした。
抑制シグナルを誘導するCTLA-4はCD4+T細胞においては、細胞内のリソソームに存在し、活性化されない場合には短期間で分解されることが判明した。TCR刺激に伴って、CTLA-4を含むリソソームは細胞膜に近づき、CTLA-4は細胞表面発現を亢進する。この際、同時にリソソームマーカーも発現し特異的酵素が分泌されることから、分泌型リソソームが細胞膜と融合することによってCTLA-4の細胞表面の発現が調節されていることを明らかにした。
IRS-1ファミリーのGab-2は、TCR刺激においてもリン酸化され、T細胞活性化に伴って、TCRシグナル伝達に重要な分子、ZAP-70,SLP-76,LAT,CD3zなどと会合する。Gab-2はZAP-70によってリン酸化され、C末端のチロシンを介してSHP-2と会合する。Gab-2はTCR刺激に伴うNFATの活性化やIL-2産生を抑制するが、SHP-2と会合できない変異Gab-2は抑制活性がないことから、Gab-2はTCR活性化に伴ってSHP-2をリクルートして活性化抑制を行なうことを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Watanabe,N.: "Mast cells induce the autoantibody-mediated vasculites syndrome through Tumor Necrosis Factor production upon triggering Fcγreceptors"Blood. 94. 3855-3863 (1999)
• [文献書誌] Nakaseko,C: "CTLA-4 engagement delivers inhibitory signal upon T cell activation in the absence of its tyrosine motif in the cytoplasmic tail"J.Exp.Med.. 190. 765-774 (1999)
• [文献書誌] Arase,K.: "Ablatiion of specific cell population by the replacement of a uniquely expressed gene with a toxin gene"Proc.Natl.Acad.Sci.. 96. 9264-9268 (1999)
• [文献書誌] Wild,M.K.: "Dependence of T cell antigen recognition on the dimensions of an accessory receptor-ligand complex"J.Exp.Med.. 90. 31-41 (1999)
• [文献書誌] Yamazaki,T.: "CAST,a novel CD3e-binding protein transducing activation signal for IL-2 production in T cell"J.Biol.Chem.. 274. 18173-18180 (1999)
• [文献書誌] Regnault,A.: "FcRg-mediated induction of dendritic cell maturation and MHC class I-restricted antigen after immune complex internalization"J.Exp.Med.. 189. 371-380 (1999)
• [文献書誌] Otsuji,M.: "Redox Regulation of Cell Signaling and its Clinical Application"Oxidative stress by tumor-derived macrophages and abnormal structure of T-cell receptor complex. 16 (1999)
• [文献書誌] Wakizaka,K.: "A novel 90kDa tyrosine-phosphorylated protein associated with TCR complex in thymocytes." Eur.J.Immunol.28. 636-645 (1988)
• [文献書誌] Adachi,S.: "Essential role of IL-7 receptor α in the formation of Peyer's patch anlage." Int.Immunol. 10. 1-6 (1988)
• [文献書誌] Saito,T.: "Negative regulation of T cell activation." Curr.Opin.Immunol.10. 313-321 (1988)
• [文献書誌] Saito,T.: "Positive and negative thymocyte selection." Crit.Rev.Immunol. 18. 359-370 (1988)
• [文献書誌] Park,S.Y.: "Resistance of Fc receptor-deficient mice to fatal glomerulonephritis." J.Clin.Inv.102. 1229-1238 (1988)
• [文献書誌] Kametani,Y.: "Ex vivo evidence for asymmetric tyrosine phosphorylation of ZAP-70 on double-positive thy-mocytes in the positive selection process." Int.Immunol.10. 1203-1210 (1988)
• [文献書誌] Miyatake,S.: "Src family tyrosine kinases associate with and phosphorylate CTLA-4(CD152)" Biochem.Biophys.Res.Commun.249. 444-448 (1998)
• [文献書誌] Ohno,H.: "The medium subunits of adaptor complexes recognize distinct overlapping sets of tyrosine-based sorting signals." J.Biol.Chem.273. 25915-25921 (1998)
• [文献書誌] Gibbins,J.M.: "The p85 subunit of phosphatidylinositol 3-kinase associates with the Fc receptor γ-chain and LAT in platelets stimulated by collagen and convulxin." J.Biol.Chem.273. 34437-34443 (1998)
• [文献書誌] Takase,K.: "Molecular cloning of pTAC12,an alternative splicing product of the CD3γ chain as a compo-nent of the pre-T cell antigen-receptor complex." J.Biol.Chem.273. 30675-30679 (1998)
• [文献書誌] Regnault,A.: "FcRγ-mediated induction of dendritic cell maturation and MHC class I-restricted antigen pre-sentation after immune complex internalization." J.Exp.Med.189. 371-380 (1999)
• [文献書誌] van Egmond,M.: "Human IgA receptor (FcaRI,CD89) function in transgenic mice requires both FcRγ chain and CR3(CD11β/CD18)." Blood. (in press).
• [文献書誌] Yamazaki,T.: "The 10th International Congress of Immunology" Monduzzi Editore S.p.A., 189-194 (1988)
• [文献書誌] Otsuji,M.: "Redox biology" Academic Press (In press),
• [文献書誌] Saijo,K.: "Crucial role of Jak3 in negative selection of self-reactive T cells" J. Exp. Med.185. 351-356 (1997)
• [文献書誌] Yamazaski,T.: "A shift from negative to positive selection of autoreactive T cells by the reduced level of TCR signal in TCR-transgenic CD3ζ-deficient mice" J. Immunol.158. 1634-1640 (1997)
• [文献書誌] Aoe,T.: "Heat shock protein 70 mRNA reflects the severity of ischemia/hypoxia-reperfusion injury in the perfused rat liver." Crit. Care Med.25. 324-329 (1997)
• [文献書誌] Poole,A.: "The Fc receptor γ-chain and the tyrosine kinase Syk are essential for activation of mouse platelets by collagen." EMBO J.16. 2333-2341 (1997)
• [文献書誌] Shiratori,T.: "Tyrosine phosphorylation controls internalization of CTLA-4 by regulating its interaction with chlathrin-associated adaptor complex AP-2." Immunity. 6. 583-589 (1997)
• [文献書誌] Miyatake,S.: "Induction of interleukin-2 unresponsiveness and down-regulation of the JAK-STAT system upon activation through the T cell receptor." Eur. J. Immunol.27. 1816-1823 (1997)
• [文献書誌] Takase,K.: "A novel 12kd dimer associated with pre-TCR complex and clonotype-independent CD3 complex on immature thymocvtes." J. Immunol.159. 741-747 (1997)
• [文献書誌] Watanabe,N.: "Th1 and Th2 subsets equally undergo Fas-dependent and independent activation-induced cell daath." Eur. J. Immunol.27. 1858-1864 (1997)
• [文献書誌] Watanabe,H.: "A novel acyl-CoA thioesterase enhances its enzymatic activity by direct binding with HIV nef." Biochem. Biophys. Res. Commun.238. 234-239 (1997)
• [文献書誌] Kosugi,A.: "Subunit composition of the pre-T-cell receptor complex analyzed by monoclonal antibody against the pre-T-cell receptor α chain" Immunology. 91. 618-622 (1997)
• [文献書誌] Arase,N.: "Association with FcRγ is essential for activation signal through NKR=P1 (CD161)NK cells and NK1. 1^+ T cells." J. Exp. Med.186. 1957-1963 (1997)
• [文献書誌] Wakizaka,K.: "A novel 90kDa tyrosine-phosphorylated protein associated with TCR complex in thymocytes." Eur. J. Immunol.(in press).
• [文献書誌] Saito,T.: "Kinases and phosphatases in lymphocyte and neuronal signaling." Springer-Verlag, Tokyo, Japan, 366 (1997)
• [文献書誌] Yamazaski,T.: "Leucocyte typing VI white cell differentiation antigens" Garland Publishing, lnc., New York and London, 1342 (1997)
• [文献書誌] Saijio,K.: "Leucocyte typing VI white cell differentiation antigens" Garland Publishing, lnc., New York and London, 1342 (1997)
• [文献書誌] Saito,T.: "Critical Reviews in Immunology" (in press),