| 研究概要 |
本年度は、主にマウス小脳顆粒細胞ニューロンの初代培養系において、カルシウムシグナル依存的に発現変化を示す一連の遺伝子群(カルシウム応答遺伝子群)の発現制御系の解析と、新たな遺伝子の検索を行った。
1.カルシウム応答遺伝子群の検索: Differential display法でこれら遺伝子の検索を行った。その結果、セクレトグラニン-II(Sg-II)遺伝子が単離された。Sg-IIは、脳由来神経栄養因子(BDNF)遺伝子とともに、細胞質膜の脱分極によって活性化を受けた。
2.カルシウム応答遺伝子群の発現制御系の解析: 電位依存性カルシウムチャネル(VDCC)からのCa^<2+>流入で、BDNF,Sg-II遺伝子はup-regulationを、NT-3遺伝子はdown-regulationを受ける。この発現制御に必要とされる細胞内Ca^<2+>濃度には、最適濃度があるらしい。また、BDNF,Sg-II遺伝子の活性化はVDCCからのCa^<2+>流入に依存していたが、c-fos誘導にはNMDAレセプターからのCa^<2+>流入も効果的であった。また、BDNF遺伝子のプロモーター解析によって、-200bp以内にカルシウム応答エレメントのあることが明らかとなった。
現在、BDNF,Sg-II,NT-3遺伝子の発現状況を、小脳発達段階を追って検討を行っている。これら遺伝子の発現と神経活動との関連を探る。
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