• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

緑膿菌の薬剤排出による多剤耐性

研究課題

研究課題/領域番号 09470079
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 細菌学(含真菌学)
研究機関東海大学

研究代表者

仲江 太治 (中江 太治)  東海大学, 医学部, 教授 (50102851)

研究分担者 米山 裕  東海大学, 医学部, 講師 (10220774)
良原 栄策  東海大学, 医学部, 助教授 (70167063)
研究期間 (年度) 1997 – 1999
研究課題ステータス 完了 (1999年度)
配分額 *注記
8,400千円 (直接経費: 8,400千円)
1999年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
1998年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1997年度: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
キーワード薬剤耐性 / ポンプ / 排出 / 膜蛋白 / トポロジー / 輸送 / 緑膿菌 / 細胞膜 / 外膜 / 異物 / 抗生物質 / 耐性 / 異物排出 / 生体防御
研究概要

緑膿菌の多剤交叉耐性の問題を解決すべく、薬剤排出ポンプ及びそれに関わる研究を行った。
(i)MexA、B-OprMポンプの各サブユニットの役割を明らかとすべく、遺伝子置換法によって各々のサブユニット遺伝子を壊した。その結果、変異菌は野生株に比べ約8倍ほど薬剤に高い感受性を示した。中でもOprM変異菌が最も感受性が高かった。
(ii)ポンプの機能を短時間に定量的に測定するための蛍光プローブの排出を測定する方法を開発した。蛍光プローブは野生株、nalB株では効率良く排出された為、細胞内蓄積がほとんど測定できなかったが、上に書いたポンプサブユニットを欠損した株では蛍光物質の細胞内蓄積が測定でき、それに要する時間は5-10分程度であった。
(iii)緑膿菌はMexA、B-OprMの他にMexC、D-OprJポンプの遺伝子を有する。そこでこれらのポンプサブユニットは相互に交換可能であるかどうかの実験を操作することによって行った。その結果、内膜成分であるMexA、BもしくはMexC、Dはそれらのサブユニットを取り替えることはできず、これらは機能単位として存在しなければポンプ機能が損なわれることが明らかとなった。一方、OprMとOprJは相互に置換可能であることが明らかとなり、雑種サブユニットから成るポンプが働いている可能性が示された。
(iv)ポンプの本体であるMexB蛋白の膜上トポロジーと明らかとすべく、C-末端をいろいろな長さに欠損したMexB遺伝子に、アルカリフォスファターゼ遺伝子を融合し、雑種蛋白を発現させた。その蛋白のアルカリフォスフォターゼ活性からMexBのトポロジーが明らかとなった。それによるとMexBは膜を12回貫通する型の輸送蛋白で、2つの大きなペリプラズムドメインを有することが明らかとなった。

報告書

(4件)
  • 1999 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1998 実績報告書
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (46件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (46件)

  • [文献書誌] Monika Germ: "Interplay between the efflux pump and the outer membrane permeability barrier in fluorescent dye accumulation in Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 261. 452-455 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hajime Ikigai: "Two forms of Vibrio chlerae O1 El Tor hemolysin derived from identical precursor protein"Biochem. Biophys. Acta. 1415. 297-305 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Resistance to beta-lectam antibiotics in Pseudomonas aeurinosa by interplay between the MexA, B-OprM efflux pump and beta-lactamase"Antimicrob. Agents Chemother. 43. 1301-1303 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kojiro Saito: "NalB-type mutaitons causing the over expression of the MexAB-OprM efflux pump are located in the MexR gene of Pseudomonas aeruginosa chromosome"FEMS Microbiology Letters. 179. 67-72 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Lan Guan: "Membrane topology of the xenobiotic-exporting subunit, MexB of the MexA, B-OprM extrusion pump in Pseudomonas aeruginosa"J. Biol. Chem.. 274. 10517-10522 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Akira Nakajima: "Antibiotic stress induces a large amount of outer membrane protein in Pseudomomas aeruginosa"FEMS Microbiology Letters. 165. 261-265 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Eisaku Yoshihara: "Identification of the Catalytic Triad of the Protein D2 Protease in Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 247. 142-145 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Keiko Suzuki: "Flocculation and Membrane Binding of Outer Membrane Protein F, Porin, at Acidic pH"Jpn. J. Appl. Phys.. 37. 2074-2077 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Keiko Suzuki: "Subunit Swapping in the Mex-Extrusion Pumps in Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 244. 898-902 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Multiantibbiotic resistance caused by active drug extrusion in the hospital pathogen"J. Infect. Chemother.. 3. 173-183 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takashi Kitahara: "Antibiotic diffusion pathways in the outer membrane of Peudomonas aer4g5n6sa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 238. 457-461 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Aydin Ocaktan: "Use of fluorescence probes to monitor function of the subunit proteins of the Mex-A-MexB-OprM drug extrusion machinery in Pseudomonas aeruginosa"J. Biol. Chem.. 272. 21964-21969 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hiroshi Yoneyama: "The role of mex-gene products in antibiotic extrusin in Pseudomonas aeruginosa."Biochem. Biophys. Res. Commun.. 233. 611-618 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Multiantibiotic resistance caused by active drug extrusion in Pseudomonas aeruginosa and other gram-negative bacteria."Microbiologia. 13. 273-284 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Monika Germ, Eisaku Yoshihara, Hiroshi Yoneyama and Taiji Nakae: "Interplay between the efflux pump and the outer membrane permeability barrier in fluorescent dye accumulation in Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 261. 452-455 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hajime Ikigai, Toshihisa Ono, Taiji Nakae, Hiaroshi Otsuru and Tadakatsu Shimamura: "Two forms of Vibrio cholerae 01 and EI Tor hemolysin derived from identical precursor protein."Biochem. Biophys. Acta. 1415. 297-305 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taiji Nakae, Akira Nakajima, Toshihisa Ono, Kohjiro Saito and Hiroshi Yoneyama: "Resistance to beta-lactam antibiotics in Pseudomonas aeruginosa by interplay between the MexA,B-OprM efflux pump and beta-lactamase"Antimicrob. Agents Chemother. 43. 1301-1303 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kohjiro Saito, Hiroshi Yoneyama, Taiji Nakae: "NalB-type mutaitons causing the over expression of the MexAB-OprM efflux pump are located in the mexR gene of Pseudomonas aeruginosa chromosome"FEMS Microbiology Letters. 179. 67-72 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Lan Guan, Michael Ehrmann, Hiroshi Yoneyama and Taiji Nakae: "Membrane topology of the xenobiotic-exporting subunit, MexB of the MexA,B-OprM extrusion pump in Pseudomonas aeruginosa"J. Biol. Chem.. 274. 10517-10522 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Akira Nakajima, Mie Hoshikawa, Taiji Nakae: "Antibiotic stress induces a large amount of outer membrane protein in Pseudomonas aeruginosa"FEMS Microbiology Letters. 165. 261-265 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Eisaku Yoshihara, Hiroshi Yoneyama, Toshihisa Ono, Taiji Nakae: "Identification of the Catalytic Triad of the Protein D2 Protease in Pseudomonas aeruginosa"Biophys. Res. Commun.. 247. 142-145 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Keiko Suzuki, Taiji Nakae, Shigeki Mitaku: "Flocculation and Membrane Binding of Outer Membrane Protein F, Porin, at Acidic pH"Jpn. J. Appl. Phys. 37. 2074-2077 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hidroshi Yoneyama, Aydin Ocaktan, Naomasa Gotoh, Takeshi Nishino, and Taiji Nakae: "Subunit Swapping in the Mex-Extrusion Pumps in Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 244. 898-902 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taiji Nakae, Eisaku Yoshihara, and Hiroshi Yoneyama: "Multiantibiotic resistance caused by active drug extrusion in the hospital pathogen"J. infect. Chemother.. 3. 173-183 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takashi Kitahara, Hiroshi Yoneyama, and Taiji Nakae: "Antibiotic diffusion pathways in the outer membrane of Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 238. 457-461 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Aydin Ocaktan, Hiroshi Yoneyama, and Taiji Nakae: "Use of fluorescence probes to monitor function of the subunit proteins of the Mex-A-MexB-OprM drug extrusion machinery in Pseudolnonas aeruginosa"J. Biol. Chem.. 272. 21964-21969 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hiroshi Yoneyama, Aydin Ocaktan, MasatakaTsuda,.M.,and Taiji Nakae: "The role of mex-gene products in antibiotic extrusion in Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 233. 611-618 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Multiantibiotic resistance caused by active drug extrusion in Pseudomonas aeruginosa and other gram-negative bacteria."Microbiologia. 13. 273-284 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Interplay between the efflux pump and the outer memberane permeability barrier in fluorescent dye accumulation in Pseudomonas aeruginosa"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 261. 452-455 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Two forms of Vibrio cholerae O1 El Tor hemeolysin derived from identical precursor protein"Biochim. Biophys. Acta. 1415. 297-305 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Resistance to beta-lactam antibiotics in Pseudomonas aeruginosa by interplay between the MexA,B-OprM efflux pump and beta-lactamase"Antimicrob. Agents Chemother.. 43. 1301-1303 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "NalB-type mutaitons causing the over expression of the MexAB-OprM efflux pump are located in the mexR gene of Pseudomonas aeruginosa chromosome"FEMS Microbiology Letters. 179. 67-72 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Membrane topology of the xenobiotic-exporting subunit,MexB of the MexA,B-OprM extrusion pump in Pseudomonas aeruginosa"J.Biol.Chem.. 274. 10517-10522 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Nakae,T.: "Subunit Swapping in the Mex-Extrusion Pumps in Pseudomonas aeruginosa" BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS. 244. 898-902 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] 中江太治: "緑膿菌の多剤交叉耐性と薬剤排出" 現代医療. 30. 1249-1254 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Taiji NAKAE: "Flocculation and Membrane Binding of Outer Membrane Protein F,Porin,at Acidic pH" Jpn.J.Appl.Phys. 37. 2074-2077 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Identification of the Catalytic Triad of the Protein D2 Protease in Pseudomonas aeruginosa" BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS. 247. 142-145 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Taiji Nakae: "Antibiotic stress induces a large amount of outer membrane protein in Pseudomonas aeruginosa" FEMS Microbiology Letters. 165. 261-265 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] 中江太治: "非特異的抗生物質耐性の機序" Clinical View. 4. 4-5 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] 中江太治 編集: "生物学と医学をつなぐ分子細胞生物学" 300 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Nakae,T: "El Tor hemolysin of Vibrio cholerae O1 forms channels in planar lipid bilayer membranes." FEMS Microbiol.Letter. 150. 249-254 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Nakae,T.: "Multiantibiotic resistance caused by active drug extrusion in Pseudomonas aeruginosa and other gram-negative bacteria." Microbiologia. 13. 273-284 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Nakae,T.: "The role of mex-gene products in antibiotic extrusin in Pseudomonas aeruginosa." Biochem.Biophys.Res.Commun. 233. 611-618 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Nakae,T.: "Use of fluorescence probes to monitor function of the subunit proteins of the Mex-A-MexB-OprM drug extrusion machinery in Pseudomonas aeruginosa" J.Biol.Chem.272. 21964-21969 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Nakae,T.: "Antibiotic diffusion pathways in the outer membrne of Pseudomonas aeruginosa" Biochem.Biophys.Res.Commun.238. 457-461 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] 中江太治: "多剤交叉耐性緑膿菌、薬を細胞から閉め出す" Mebio. 47-55 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

URL: 

公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi