| 研究課題/領域番号 |
09480199
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
細胞生物学
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| 研究機関 | (財)癌研究会 |
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研究代表者 |
宮園 浩平 財団法人癌研究会, 癌研究所・生化学部, 部長 (90209908)
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| 研究分担者 |
石堂 康弘 財団法人癌研究会, 癌研究所・生化学部, 研究員 (10300740)
花井 順一 財団法人癌研究会, 癌研究所・生化学部, 研究員 (70261964)
今村 健志 財団法人癌研究会, 癌研究所・生化学部, 研究員 (70264421)
加藤 光保 財団法人癌研究会, 癌研究所・生化学部, 研究員 (20194855)
川畑 正博 財団法人癌研究会, 癌研究所・生化学部, 主任研究員 (60224838)
一條 秀憲 財団法人癌研究會, 癌研究所・生化学部, 主任研究員 (00242206)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
15,100千円 (直接経費: 15,100千円)
1998年度: 6,900千円 (直接経費: 6,900千円)
1997年度: 8,200千円 (直接経費: 8,200千円)
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| キーワード | TGF-β / 骨形成因子 / 癌抑制遺伝子 / シグナル伝達 / 増殖抑制 / Smad / セリン・スレオニンキナーゼ / 遺伝子ターゲッテイング / レセプター / アクチビン / アポトーシス |
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| 研究概要 |
1. Tkv結合蛋白質クローニングとその哺乳類細胞での機能解析:ショウジョウバエのセリン-スレオニンキナーゼ型レセプターであるThick veins(Tkv)に結合する蛋白質をtwo-hybrid法で検索し、DIAP1(Drosophila apoptosis inhibitor-1)をクローニングした。
2. Smadのシグナル伝達機構における役割:我々はSmadファミリーの分子をその構造と働きから、特異型、共有型、抑制型の3種類に分類できることを明らかにした。また新しいSmad分子であるSmad6をクローニングした。Smad6は他のSmadの作用を抑制する抑制型Smadであることが明らかとなった。
3. 骨形成因子のシグナル伝達におけるSmadの役割と遺伝子導入による解析:アデノウイルスベクターに組み込んだSmad1やSmad5を骨芽細胞前駆細胞に導入してその作用を調べた。Smad1やSmad5は単独で細胞に感染させても骨芽細胞への分化誘導活性は低いが、低濃度のBMPや活性化型レセプターを加えると、作用の劇的な増強が見られた。
4. TGF-βシグナルに関与するSmad3の変異体の機能解析と腫瘍形成能:Smad3の407番目のアスパラギン酸のグルタミン酸への変異を作り、その作用を検討した。変異型Smad3はTGF-βのシグナルを伝達しないだけでなく、優勢抑制型変異体として作用した。変異型Smad3を大量に発現している細胞ではTGF-βの増殖抑制作用に対し抵抗性になっていた。さらにこれらの細胞をコラーゲンゲルの上で3次元培養するとコラーゲンゲルの中に細胞が浸潤していく像が見られた。
5. シグナル伝達分子の遺伝子ターゲッテイング:BMPレセプターII型遺伝子およびSmad2のターゲッテイングを行った。いずれも発生初期の段階で致死的であった。
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