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自己免疫性疾患に関与する特異的B細胞破壊法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 09557064
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 皮膚科学
研究機関慶応義塾大学

研究代表者

天谷 雅行  慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)

研究分担者 高柳 淳  慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80245464)
清水 信義  慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50162706)
清水 宏  慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (00146672)
西川 武二  慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
研究期間 (年度) 1997 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
12,100千円 (直接経費: 12,100千円)
1998年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1997年度: 10,500千円 (直接経費: 10,500千円)
キーワード自己免疫性疾患 / 天疱瘡 / B細胞 / 疾患特異的治療法 / 組換え毒素 / カドヘリン / デスモグレイン / 細胞接着
研究概要

本研究の目的は、より疾患特異性の高い副作用の少ない自己免疫性疾患に対する新しい治療法の開発を目指し、患者血中を循環する自己抗体を産生するB細胞に照準を当て、正常なB細胞を破壊することなく病的なB細胞のみを破壊する選択的除去法を開発する事である。対象疾患は、表皮接着分子であるデスモグレイン3(Dsg3)に対する自己抗体が産生される尋常性天瘡である。平成9年度は、治療法の効果判定に必要な疾患モデルをマウスを用いて作成した。天庖瘡抗原本来の立体構造を正しく反映した組換え抗原蛋白(rDsg3)をマウスに免疫し、デスモグレインに対する自己抗体の誘導を試みた。免疫後、rDsg3を抗原として用いた組換え抗原蛋白に対する抗体の産生能をELISA法にて検討したところ、免疫後3週から4週にて抗体価の上昇を認めた。平成10年度は、Dsg3の細胞外領域と毒素とのキメラ分子(組換え毒素)を作製した。自己抗体産生B細胞の膜表面にはDsg3に対するイムノグロブリン受容体が発現されており、組換え毒素はDsg3部分がリガンドとなり抗原特異的にB細胞を認識できる。毒素は、Pseudomonas Exotoxin(PE40)を用いた。発現系として、PE40は真核細胞に対して毒性を持つため、大腸菌の発現系を用いた。また、可溶性を増すために、N末にはthioredoxin(TRX)を挿入した。Dsg3は、主要エピトープを含むN末1/3の相当するEC1およびEC2の約半分の領域を含むものを使用した(Dsg3DN1)。組換え毒素は、TRX-Dsg3DN1-PE40として発現させたものを、トロンビン処理によりTRXを除き、Dsg3DN1-PE40とした。Dsg3に対するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞、ならびに平成9年度に作製した天庖瘡マウスの脾細胞を標的細胞として、毒素活性を検討したところ、抗原特異的に約60%の細胞を除去することに成功した。本研究の成果は、抗原特異的B細胞破壊法の実用化に向けて大きく一歩前進したことになる。

報告書

(3件)
  • 1998 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (24件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (24件)

  • [文献書誌] Ishii K, Amagai M, Hall RP, Hashimoto T, Takayanagi A, Gamou S, Shimizu N, Nishikawa T: "Characterization of autoantibodies in pemphigus using antigen-specific ELISAs with baculovirus expressed recombinant desmogleins" J Imunol. 159. 2010-2017 (1997)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hertl M, Karr RW, Amagai M, Katz SI: "Heterogeneous MHC II restriction pattern of autoreactive desmoglein 3 specific T cell responses in pemphigus vulgaris patients and normals" J Invest Dermatol. 110. 388-392 (1998)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Amagai M, Nishikawa T, Nousari HC, Anhalt GJ, Hashimoto T: "Antibodies against desmoglein 3 (pemphigus vulgaris antigen) are present in sera from patients with paraneoplastic pemphigus and cause acantholysis in vivo in neonatal mice" J Clin Invest. 102. 775-782 (1998)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Amagai M, Tsunoda K, Zillikens D, Nagai T, Nishikawa T: "The clinical phenotype of pemphigus is defined by the anti-desmoglein autoantibody profile" J Am Acad Dermatol. 40. 167-170 (1999)

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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Proby C, Fujii Y, Owaribe K, Nishikawa T, Amagai M: "Human autoantibodies against HD1/plectin in paraneoplastic pemphigus" J Invest Dermatol. 112. 153-156 (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mahoney MG, Wang Z, Rothenberger KL, Koch PJ, Amagai M, Stanley JR: "Explanation for the clinical and microscopic localization of lesions in pemphigus foliaceus and vulgaris" J Clin Invest. 103. 461-468 (1999)

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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ishii K,Amagai M,Hall RP,Hashimoto T,Takayanagi A,Gamou S,Shimizu N,Nishikawa T: "Characterization of autoantibodies in pemphigus using antigen-specific ELISAs with baculovirus expressed recombinant desmogleins." J Immunol. 159. 2010-2017 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hertl M,Karr RW,Amagai M,Katz SI: "Heterogeneous MHC II restriction pattern of autoreactive desmoglein 3 specific T cell responses in pemphigus vulgaris patients and normals." J Invest Dermatol. 110. 388-392 (1998)

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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Amagai M,Nishikawa T,Nousari HC,Anhalt GJ,Hashimoto T: "Antibodies against desmoglein 3 (pemphigus vulgaris antigen) are present in sera from patients with paraneoplastic pemphigus and cause acantholy-sis in vivo in neonatal mice." J Clin Invest. 102. 775-782 (1998)

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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Amagai M,Tsunoda K,Zillikens D,Nagai T,Nishikawa T: "The clinical phenotype of pemphigus is defined by the anti-desmoglein autoantibody profile." J Am Acad Dermatol. 40. 167-170 (1999)

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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Proby C,Fujii Y,Owaribe K,Nishikawa T,Amagai M: "Human autoantibodies against HD1/plectin in paraneoplastic pemphigus." J Invest Dermatol. 112. 153-156 (1999)

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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mahoney MG,Wang Z,Rothenberger KL,Koch PJ,Amagai M,Stanley JR: "Explanation for the clinical and microscopic localization of lesions in pemphigus foliaceus and vulgaris." J Clin Invest. 103. 461-468 (1999)

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    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hertl M, Karr Rw, Amagai M, Katz SI: "Heterogeneous MHC II restriction pattern of autoreactive desmoglein 3 specific T cell responses in pemphigus vulgaris patients and normals" J Invest Dermatol. 110. 388-392 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Amagai M, Nishikawa T, Nousari HC, Anhalt GJ, Hashimoto T: "Antibodies against desmoglein 3(pemphigus vulgaris antigen)are present in sera from patients with paraneoplastic pemphigus and cause acantholysis in vivo in neonatal mice" J Clin Invest. 102. 775-782 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Amagai M, Tsunoda K, Zillikens D, Nagai T, Nishikawa T: "The clinical phenotype of pemphigus is defined by the anti-desmoglein autoantibody profile" J Am Acad Dermatol. 40. 167-170 (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Proby C, Fujii Y, Owaribe K, Nishikawa T, Amagai M: "Human autoantibodies against HD 1/plectin in paraneoplastic pemphigus" J Invest Dermatol. 112. 153-156 (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Mahoney MG, Wang Z, Rothenberger KL, Koch PJ, Amagai M, Stanley JR: "Explanation for the clinical and microscopic localization of lesions in pemphigus foliaceus and vulgaris" J Clin Invest. 103. 461-468 (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Amagai M, Komai A, Hashimoto T, Shirakata Y, Hashimoto K, Yamada T, KitajimaY, Ohya K, Iwanami H, Nishikawa T: "Usefulness of enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)using recombinant desmogleins 1 and 3 for serodiagnosis of pemphigus" Br J Dermatol. 140. 351-357 (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Hernandez C, Amagai M, Woodley DT, Chan LS: "Pemphigus foliaceus:preferential binding of IgG1 and C3 at the upper epidermis..." Br J Dermatol. 136. 249-252 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Kubo A, Amagai M, Hashimoto T, Doi T, Higashiyama M, Hashimoto K, Yoshikawa K: "Herpetiform pemphigus showing reactivity with pemphigus vulgaris antigen(desimoglein 3)" Br J Dermatol. 137. 109-113 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Ishii K, Amagai M, Hall BP, Hashimoto T, Takayanagi A, Gamou S, Shimizu S, Nishikawa T: "Characterization of autoantibodies in pemphigus using antigen-specific ELISAs with baculovirus expressed recombinaut desmogleins." J Immunol. 159. 2010-2017 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Hashimoto T.et al: "Human desmocollin 1(Dsc1)is an autoantigen for the subcorneal pustular dermatosis type of IgA pemphigus." J Invest Dermatol. 109. 127-131 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Shirakata Y, Amagai M,Hanakawa Y, Nishikawa T, Hashimoto K.: "Lack of mucosal involument in pemphigus foliaceus may be due to low expression of desmoglein 1." J Invest Deranatol. 110. 76-78 (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Hertl M, Amagai M, Sundarain H, Stanley JR, Ishii K, Katz SI: "Recognition of desmoglein 3 by autoreactive T cells in peinphigus vulgaris patients and normals." J Invest Dermatol. 110. 62-66 (1998)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

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公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

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