| 研究課題/領域番号 |
09670014
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
解剖学一般(含組織学・発生学)
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
片岡 勝子 広島大学, 医学部, 教授 (30034002)
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| 研究分担者 |
洲崎 悦子 広島大学, 医学部, 助手 (10274052)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
1999年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1998年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1997年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | ゴルジ装置 / レクチン細胞化学 / 蛍光多重染色 / 共焦点レーザー走査顕微鏡 / 三次元構造 / 十二指腸腺 / 杯細胞 / 胃腸粘膜 / レクチン組織化学 / 粘液細胞 / ブルンナー腺 / 腸 |
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| 研究概要 |
糖タンパク分泌細胞においては、ゴルジ装置の各層板と分泌顆粒をレクチン組織化学的に検出できる。私達はまず、蛍光標識レクチンを用いてマウス胃腸の各種糖タンパク分泌細胞のゴルジ装置と分泌顆粒を蛍光標識し、共焦点レーザー顕微鏡で観察し、立体構造を解析した。十二指腸腺細胞のゴルジ装置は基本的には核上部にドーム状をなし、ドームの外側がcis側、内側がtrans側で、ドーム壁には多数の孔がある。分泌顆粒はドーム内に放出された後、ドーム壁の孔を通って細胞頂部に運ばれる。腸の杯細胞では、分泌顆粒の形成が活発な若い細胞のゴルジ装置は、やはりドーム型であるが、孔は十二指腸細胞の場合よりも大きく、分泌顆粒が大きいためと考えられる。杯細胞では顆粒の貯留とともにドームの天井部の孔が拡大し、細胞上部に大きく開いて、いはば杯状になる。胃の表層粘液細胞でも、やはり基本はドーム型で、分泌顆粒の貯留とともに杯状になる。腸の吸収上皮細胞は、glycocalyxに富む刷子縁細胞膜の形成・輸送などのために、この方法でゴルジ装置を可視化できるが、やはり基本型はドーム状であった。
ゴルジ装置は渡銀染色し、直接立体観察装置で観察した結果も上記のことを支持した。さらに、胃の主細胞や膵外分泌細胞では、基本型はドーム状で、細胞が成熟するとドーム壁のすべての孔が拡大し、籠状になることが示唆された。
微小管は分泌装置と関係が深い。私達はTaxolの使用、collagenase処理、Alexaの利用により、分泌活動の活発なin situの上皮性細胞で微小管を明瞭に示すことに成功し、ゴルジ装置や分泌顆粒との密接な関係を示唆する像を得た。今後はこの方法を応用し、分泌装置の三次元構造の形成機構を明らかにしたい。
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