| 研究課題/領域番号 |
09670094
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
薬理学一般
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
谷山 紘太郎 (谷山 絋太郎) 長崎大学, 医学部, 教授 (70030898)
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| 研究分担者 |
山下 康子 長崎大学, 医学部, 助手 (80291532)
貝原 宗重 長崎大学, 医学部, 講師 (40274633)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1998年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1997年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
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| キーワード | アフリカツメガエル卵母細胞 / ラット脳mRNA / ドパミン遊離 / シナプトフィジン / GABA_B受容体 / GABA_BR1c / GABA_BR1d / G蛋白質依存性内向き整流K^+チャネル(GIRK) / GABA_BRIC / GIRK / ドパミン / γ-アミノ酪酸(GABA) / 神経終末 / 開口放出 / プロテインキナーゼC |
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| 研究概要 |
アフリカツメガエル卵母細胞にラット脳mRNAを移入すること&とより卵母細胞に神経終末と同様の機能を発現させ、神経伝達物質遊離に抑制的に機能するGABA_B受容体を標的にし、卵母細胞でのGABA_B受容体機能の高効率発現法および構造解析を行った。
1) ラット脳mRNAを移入した卵母細胞では高K^+誘発により外液Ca^<2+>依存性のドパミン遊離を惹起したが、mRNAと共にシナプトフィジン(SP)抗体を移入した卵母細胞では、約40%に減少した。mRNAを移入していない卵母細胞にはSPが存在しないが、mRNAを移入したことにより卵母細胞にSPが発現したことから、ドパミン遊離にSPが関与することが明らかになった。
2) ラット小脳mRNAとG蛋白質依存活性化内向き整流性K^+チャネル(GIRK)のcDNAを卵母細胞に移入することにより、バクロフェン(GABA_B受容体作用薬)による内向き整流性K^+電流の発生が移入卵母細胞の65%以上に発現した。この反応はGABA_B受容体拮抗物質によりブロックされたので、ラット小脳mRNAとGIRK-cDNAの共移入により卵母細胞に高効率でGABA_B受容体機能を発現させることができた。
3) 既に報告されているGABA_B受容体の2つのクローンに加え、新たなGABA_B受容体のサブタイプをコードするクローン(GABA_BR1c,GABA_BR1d)を見出した。GABA_BR1c-mRNAは大脳、小脳、眼、心臓、肺、胃、小腸、結腸、肝臓、脾臓、腎、膀胱、骨格筋に存在したが、GABA_BR1d-mRNAは大脳、小脳、眼、腎、膀胱に存在し、GABA_BR1は中枢神経系のみならず、末梢にも存在し、何らかの機能を発現することが示唆された。
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