| 研究課題/領域番号 |
09670304
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
細菌学(含真菌学)
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| 研究機関 | 徳島文理大学 |
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研究代表者 |
岡本 敬の介 徳島文理大学, 薬学部, 教授 (70131183)
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| 研究分担者 |
山中 浩泰 徳島文理大学, 薬学部, 助教授 (30202386)
藤井 儀夫 (藤井 義夫) 徳島文理大学, 生薬研究所, 助教授 (60122587)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1998年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1997年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
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| キーワード | 大腸菌 / 下痢 / 毒素 / 分泌 / 成熟 / 遺伝子操作 / 膜 / ジスルフィド精合 / ジスルフィド結合 |
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| 研究概要 |
毒素原性大腸菌から産生される耐熱性エンテロトキシンにはSTIとSTIIの2種類が知られている。菌体内で生合成されたこれらのSTは効率よく菌体外に分泌され、分泌されたSTが宿主に下痢を引き起こす。細胞質で生合成されたばかりのSTIとSTIIはともに未成熟毒素であり、毒素活性はない。この未成熟のSTがいかにして活性を有する毒素に変換され、如何にして菌体外に放出されるのかを研究し、以下のことを明らかにした。
1、 STI、STIIはともに分子内にジスルフィド結合を有しており、このジスルフィド結合が欠損すると毒素活性は消失する。このジスルフィド結合が如何なる様式で架橋されるのか、またSTの分泌にジスルフィド結合の架橋が必要なのか否かを調べた。その結果STI、STIIのジスルフィド結合はともにペリプラスムに存在するDsbA酵素によって架橋されていること、STIの分泌にはジスルフィド結合は絶対に必要ではないが、STIIの分泌にはジスルフィド結合の架橋は必須であることが判明した。またSTIの7位のグルタミン酸がdsbAとの反応には必要であることも明らかにした。
2、 グラム陰性細菌の外膜に存在するToIC蛋白はタンパクのみならず抗生物質などの低分子化合物の菌体外への分泌に関与していることが報告されている。ToICがSTIの菌体外への分泌にも関与しているか否かを確かめるため、toIC変異株を作製し、変異株からのSTIの分泌、相補試験を行った結果、toICがSTIの菌体外への分泌に直接関与していることわかった。またSTIIの菌体外への分泌にtoICが関与しているとの報告があり、我々の系でも、この事実を確認した。
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