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新規糖鎖標識法の開発と唾液特異ABHエピトープ解析への応用

研究課題

研究課題/領域番号 09670449
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 法医学
研究機関和歌山県立医科大学

研究代表者

木村 章彦  和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60136611)

研究分担者 井上 啓史  和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (80285387)
研究期間 (年度) 1997 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
1998年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1997年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
キーワード糖鎖 / 蛍光標識 / 高速液体クロマトグラフィー / ELISA / TLC
研究概要

平成9年度は、糖鎖の構造解析をより容易なものとするため、高速液体クロマトグラフィーで分析可能で、且つELISAやTLC-イムノブロッティングに使用可能な新規蛍光糖鎖標識試薬を作製する目的で、1,4-aminobenzoicacidと直鎖脂肪族アルコール(C8,C16)を用いて脱水縮合反応により疎水性の高い芳香族アミノエステル(amino-C8,amino-C16)を合成した。この標識試薬をヒドラジン分解により唾液ムチンより切り出したABO式血液型活性糖鎖の標識および構造解析に適用したが期待した結果を得ることはできなかった。
そこで平成10年度は、鎖長の異なる直鎖脂肪族アルコール(C12,C14)を用いて同様の蛍光糖鎖標識試薬を合成し、オリゴ糖の標識および構造解析への有用性について検討を行った。しかし、いずれの試薬も高速液体クロマトグラフィーによる標識糖鎖の分離とELISAおよびTLCによる分析の両方に適する特性を有していなかった。残念ながら本研究の基礎となる「芳香族アミノエステルを構成する直鎖脂肪族アルコールの鎖長を選択すれば高速液体クロマトグラフィーで分析可能で、且つELISAやTLC-イムノブロッティングに使用可能な新規蛍光糖鎖標識試薬に成りうる」と言う仮説の実証は失敗に終わった。以上の様に本研究は所期の目的を十分に達成し得たとは言い難い。しかし本研究の主題ではないが、多くのABO式血液型活性糖鎖に対するモノクローナル抗体を作製し、その内から法医学実務に有用な優れた特性を有するモノクローナル抗体を多数得ることができた。またさらに、異なった免疫法により糖タンパクの糖鎖あるいはタンパク部分に対するモノクローナル抗体を選択的に作製することが可能なことを明らかにした。

報告書

(3件)
  • 1998 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (4件)

  • [文献書誌] Kimura Akihiko: "Differential production of monoclonal antibodies to carbohydrate moiety or peptides moiety of glycoproteins by different routes of immunization" HYBRIDOMA. 17・3. 245-250 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kimura Akihiko: "Monoclonal antibodies to ABO blood group antigens specific for body fluids" ADVANCES IN LEGAL MEDICINE. 3. 599-602 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kimura A.: "Differential production of monoclonal antibodies to carbohydrate moiety or peptides moiety of glycoproteins by different routes of immunization" HYBRIDOMA. 17-3. 245-250 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kimura A.: "Monoclonal antibodies to ABO blood group antigens specific for body fluids" ADVANCES IN LEGAL MEDICINE. 3. 599-602 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要

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公開日: 1997-04-01   更新日: 2017-10-12  

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