| 研究課題/領域番号 |
09671545
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
麻酔・蘇生学
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
渡辺 逸平 新潟大学, 医学部附属病院, 助手 (00251819)
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| 研究分担者 |
藤原 直士 新潟大学, 医療技術短期大学部, 助教授 (70181419)
多賀 紀一郎 新潟大学, 医学部附属病院, 講師 (00163329)
佐藤 一範 新潟大学, 医学部附属病院, 講師 (70126415)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
1998年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1997年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
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| キーワード | 脳虚血 / 虚血耐性 / Spreading Depression / NMDA / c-fos / in situ hybridization / グルタミン酸 / Spreading depression(SD) / 乳酸 / 細胞内遊離カルシウム |
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| 研究概要 |
1. 虚血耐性を獲得させた神経細胞のNMDAに対する反応性の変化の有無を電気生理学的に検索した.虚血耐性はラット脳表面に直接3MKClを浸した綿栓で化学的に刺激して誘発した.その24時間後Bregmaから4mm尾側の大脳スライス冠状切片標本を作製し、これをWhole cellpatch clamp法を用いて電気生理学的に検索した.化学的刺激を加えた側を前処置側、何もしていない側を対象側として頭頂から側頭にかけての大脳皮質第2層の神経細胞に微小ガラス電極を刺入し膜電流を記録した.膜電流の安定後、種々の濃度のNMDA潅流液に対する膜電流の変化および膜電流が観察された細胞に対して外部から電位を変化させ,NMDAの反応によって流れる電流を観察して電流一電圧曲線を得た.その結果、前処置側、対象側共に数μMのNMDA濃度で反応し、電流一電圧曲線にも両群に有意な差は認められなかった.以上の結果より、虚血耐性獲得機序がNMDA受容体のNMDAに対する反応性を変化させることによるものではないことがわかった.
2. 虚血耐性誘発に利用されるCortical Spreading Depression(以下CSD)が、その後の遺伝子発現に与える影響を検索した.ラット脳表面を直接電気刺激してCSDを定量的に誘発し、その1時間後にBregmaから約4mm尾側、厚さ250μmの大脳スライス標本を作製した.これをin situ hybridization法により早期発現性遺伝子の一種であるc-fosの発現を検索した.その結果c-fosの発現量は麻酔薬の種類・麻酔濃度によらず、CSDの回数に依存して発現した.このことからCSDによって虚血耐性を誘発させる場合、少なくとも早期発現性遺伝子まではそのCSDの刺激回数(刺激強度)に応じて発現してくることがわかった.
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