• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

破骨細胞内で発現する分化誘導のシグナル分子の分子生物学的検索及び解析

研究課題

研究課題/領域番号 09671899
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 機能系基礎歯科学
研究機関佐賀医科大学

研究代表者

久木田 明子  佐賀医科大学, 医学部, 助手 (30153266)

研究分担者 久木田 敏夫  九州大学, 歯学部, 助教授 (70150464)
研究期間 (年度) 1997 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
1998年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1997年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
キーワード破骨細胞 / 分化 / レセプター / チロシンキナーゼ / シグナル伝達
研究概要

造血系の種々の細胞においては、Stem cell factor(SCF)あるいはM-CSF等のチロシンキナーゼ型レセプターが細胞の分化において重要な働きを持つことが明らがにされている。破骨細胞においても同様なレセプターが発現し分化のシグナル因子として働いている可能性がある。
(1)我々はラット骨髄細胞から単核の破骨細胞の前駆細胞(POCs)を誘導する培養系を用いて、細胞からRNAを抽出しチロシンキナーゼの活性部位をもとにデザインしたプライマーを用いて、POCsで発現すると考えられるレセプター型チロシンキナーゼの活性部位を含む約200bpのフラグメントをPCRを用いて増幅した。(2)さらにコントロールとしてPOCを誘導しない条件(骨髄細胞を活性型ビタミンD3のみで処理)からも同様にRNAを抽出し、同フラグメントをPCRを用いて増幅した。(1)のフラグメントをpT17-Blueベクターに挿入し、計1800クローンについては(1)と(2)のフラグメントをプローブとして用いdifferential hybridizationを行い、(1)のプローブでのみ検出されるクローンについてその塩基配列を解折した。その結果、新たなレセプターを単離することは出来なかったが、マウスのepitherial cell kinase(ECK)とアミノ酸レベルで100%一致するクローンが破骨細胞の分化誘導時に見い出されることがわかった。ラットECKの発現の特異性を確かめるために、ラット骨髄細胞を種々の条件で培養しRNAを抽出しRT-PCRによりECKの発現を検討したところ、破骨細胞の分化誘導時により高い発現がみられた。今後マウスの破骨細胞分化系を用いて破骨細胞の分化におけるECKの発現を確認するとともに、in vivoの破骨細胞におけるECKの発現及び既に明らかにされているECKのリガンドの破骨細胞の分化の関与についても調べる予定である。

報告書

(2件)
  • 1998 研究成果報告書概要
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (10件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (10件)

  • [文献書誌] Y.Ogata: "A novel role of IL-15 in the development of osteoclastsi Inability to replace its activity with IL-2" J.Immunology. 162. 2754-2760 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 久木田明子: "無血清培地における破骨細胞前駆細胞の形成とM-CSFの影響" 歯科基礎医学会雑誌. 40. 161-169 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Harada: "Involvement of lymphocyto function-associated antigen-1 and Interacollular adhesion molecle-1 inosteoclastogenesis:Apossivele rule indirect interaction between osteoclast preursous" Endocrinology. 138. 3957-3975 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Ogata, A.Kukita, T.Kukita, M.Komine, A.Miyahara, S.Miyazaki and O.Kohashi: "A novel role of IL-15 in the devlopment of osteoclasts : Inability to replace its activity with IL-2." J.Immunology. 162. 2754-2760

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Kukita, T.Kukita, O.Kohashi: "Induction of mononuclear preosteoclast-like cells in serum-free culture and the effect of macrophage colony-stimulating factor on the formation." Japanese Journal of Oral Biology. 40. 161-169 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Harada, T.Kukita, A.Kukita, Y.Iwamoto and T.Iijima: "Involvement of lymphocyte function-associated antigen-1 and Intercellular adhesion molecule-1 in osteoclastogenesis : A possible role in direct interaction between osteoclast precursors." Endocrinology. 139. 3957-3975 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kukita: "Macrophage Inflammatry protein-la(LD78)expressed in human bone marrow: Its rclein regulation of hemotopoiesis and osteoclast recruitment" Lab.Invest.76. 399-406 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] T.Kukita: "Regulation of osteoclast genesis by antisense oligonuclectides specific to zinc finger nuclean transcription factors Egr-lond WT-lin rat bone marrow cultap system" Endocrinology. 138. 4384-4389 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] T.Kukita: "Laminin,A major basement membrane component of the blood uessu,as a negative regulator of osteoclastgenesis" Calcif.Tissue Int. (in press).

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] T.Kukita: "Successful detection of active osteoclasts in situ by systemic administration of an osteoclast-specific monoclonal antibody." Calcif.Tissue Int.(in press).

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

URL: 

公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi