| 研究課題/領域番号 |
09671912
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
機能系基礎歯科学
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| 研究機関 | 愛知学院大学 |
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研究代表者 |
戸苅 彰史 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (80126325)
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| 研究分担者 |
近藤 史実 愛知学院大学, 歯学部, 助手 (70301629)
茂木 眞希雄 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (00174334)
新井 通次 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (20097538)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
1998年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1997年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | 骨芽細胞 / 一酸化窒素 / ビオプテリン / アポトーシス / サイトカイン / mRNA / NF-χB / RT-PCR |
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| 研究概要 |
骨芽細胞様細胞(MC3T3-E1細胞)において、炎症性サイトカイン(IL-β(100U/ml)+TNF-α(1ng/ml)+IFN-γ(200U/ml))が、誘導型NO合成酵素(iNOS)およびGTP-シクロヒドロラーゼ(GTP-CH)のmRNAを共発現させることを見いだし、このサイトカインによるiNOSおよびGTP-CHの両者の遺伝子発現にNF-χBおよびAP-1が関連していることを転写因子の阻害剤を用いて薬理学的に明らかにした。更にこの共発現の生理的意義を検討したところ、共発現した酵素の最終産物であるBH4およびNOが細胞の増殖に関して相反する作用を有していることを認めた。すなわち、BH4(セピアプテリンから誘導)による細胞増殖の促進およびNO(S-nitroso-N-acetyl-D,L-Penicillamineから生成)による細胞増殖の抑制現象である。さらに、BH4はNOにより誘導される細胞内の核DNAの断片化を防御した。これらの結果から、iNOSおよびGTP-CH酵素の最終産物はアポトーシスに対して相反する作用を示し、結果として細胞増殖に対しても相反する生理学的役割を有することを示した。そこで次に、この様なBH4およびNOによる生理作用が、炎症性サイトカイン刺激後の細胞において認められるか否か検討した。その結果、サイトカインは細胞内のBH4およびNO量を共に用量依存的に増大させること、高用量においてはNO量の増大が著しいことを観察した。DNAフラグメンテーションを指標にしたアポトーシスおよび細胞増殖の抑制は高用量のサイトカイン刺激後に観察された。この高用量のサイトカインにより生理的に生じたアポトーシスは細胞内に発生したNOを消去する薬剤(Carboxy-PTIO)あるいは細胞内のBH4量を増加させる薬剤により抑制された。これらの結果より、炎症性サイトカインが細胞増殖/アポトーシスに対して相反する生理作用を有するBH4およびNOの生成に影響を及ぼし、その生成バランスの調節が細胞増殖/アポトーシスなどに影響を及ぼしている可能性を示した。
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