| 研究課題/領域番号 |
09680047
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
家政学
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| 研究機関 | 武庫川女子大学 |
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研究代表者 |
土井 裕司 武庫川女子大学, 生活環境学部, 助教授 (50106267)
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| 研究分担者 |
川上 美佐子 武庫川女子大学, 生活環境学部, 助手 (10231268)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
1998年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1997年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | 大麦 / 分級粉 / アミノペプチダーゼ / 中性アミノペプチダーゼ / 基質親和性 / 大麦分級粉 / 基質特異性 / 最適pH |
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| 研究概要 |
本研究者は先に、大麦穀粒の表面近くから得られる分級粉中にアミノペプチダーゼが存在する事を見いだしている。ここでは、その精製を確立し、諸性質を明らかにし、その利用のための基礎データを蓄積することを目的としている。
大麦のアミノペプチダーゼは、95-85%分級粉から、冷アセトン処理、酢酸緩衝液抽出、硫安分別、Sephacryl S-200-HRゲル濾過、PEIイオン変換、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、そして、Sephacryl S-100HRゲル濾過の過程によって精製された。
精製酵素標品の至適pHが各種の合成基質を用いて検討された結果、いずれの基質に対しても、pH7.0-8.0の間にあった。ロイシン-p-ニトロアニリドを基質としたとき、至適pHは7.0、Km値は0.22mMであった。p-ニトロアニリド基質では、フェニールアラニン基質としたときに反応速度が速く、ロイシンの場合の2.4倍であった。イミノ酸や塩基性アミノ酸に対しては、ロイシンの場合の約1/3であった。酸性アミノ酸は基質とならなかった。β-ナフチルアミドを基質では、フェニールアラニン-β-ナフチルアミドでは、至適pH8.0でKm値0.047mMであった。p-ニトロアニリドよりはβ-ナフチルアミドに対して親和性が大きく、イソロイシン-β-ナフチルアミドでKm値0.15mM、セリン-β-ナフチルアミドでKm値0.57mMであった。酸性アミノ酸のβ-ナフチルアミド基質は加水分解されなかった。チオール酵素阻害剤であるロイペプチンでは阻害されなかった。以上の結果から、本酵素は、Mikola and Mikolaの分類ではニュートラルアミノペプチダーゼに分類されると結論される。
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